免疫原
擬南芥ACC基因重組UniProt: P56765, TAIR:ATCG00500
主機的兔子
單克隆多克隆
純度血清
格式凍干
數量100µl
重建時加入無菌水100µl
為恢復需要,加入無菌水100µl。凍干抗體可在-20或-80℃保存。一旦重組,就進行分配,以避免反復的凍融循環。請記住旋轉管簡單之前,打開他們,以避免任何損失,可能發生的材料粘附到帽或管的側面。
Western blot (WB)
推薦稀釋1:25 00 (WB)
預計|明顯MW 55,63 kDa
用含50 мM hepe - koh、pH 7.5、330 мMshanlichun、2 мM EDTA、1 мM MgCl 2,5 мM、0.05% BSA的緩沖液提取14齡擬南芥幼苗可溶性蛋白20 μg,在70℃變性5 min。樣品用10% SDS-PAGE分離,在20%甲醇存在的標準轉移緩沖液中,用半干轉移(Bio-Rad)印跡1h至硝酸纖維素膜(Amersham prolan)。在阻斷步驟之前,用1% Ponceau S染色檢查蛋白轉移到膜上。在室溫下,用5%牛奶在TBS中阻斷印跡1h,然后在一抗中攪拌稀釋1:3 000孵育1h。將抗體溶液倒出,將印跡簡單沖洗兩次,然后在TBS-T中洗滌一次15分鐘,攪拌3次5分鐘。將印跡用二抗(山羊抗兔IgG,馬蘿卜過氧化物酶偶聯,AS09 602, Agrisera)稀釋至1:50 000 (Agrisera),在室溫下攪拌1h。如上所述,用化學發光檢測試劑或Agrisera ECL超亮檢測試劑(AS16 ECL- s)洗滌印跡并顯像5分鐘。使用C-DiGit掃描儀(LI-COR)獲得印跡圖像。