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DH10B 電擊感受態細胞只能用于電擊轉化，不能用于熱激轉化。DH10B菌株來源于MC1061菌株，mcrA、mcrBC及mrr突變使DH10B菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(無論真核生物還是原核生物的基因組DNA都能被高效的轉入DH10B中)。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質粒DNA 的提取。中80dlacZM15標記的存在使DH10B可用于藍白斑篩選，rpsL賦予其-lianmeisu抗性。DH10B感受態細胞適用于大質粒的構建或者各種文庫構建，經特殊工藝制作，pUC19質粒檢測轉化效率>10"cfu/μg DNA。基因型為:F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) ф80lacZΔM15ΔlacX74recAl endAlaraD139 △(ara, leu)7697 galE15 galK λ-rpsL nupG
操作方法:
1.0.1cm 電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5min,待其瀝干水分,正置5min,使乙醇充分揮發,待乙醇揮發干凈立即插入冰中,壓實冰面,電極杯頂離冰面0.5cm 以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5min充分降溫。
2.取-70℃保存的DH10B電擊感受態細胞插入冰中5min,待其融化,加入目的DNA(質?；蜻B接
產物)并用手boda離心管底輕輕混勻,避免產生氣泡,立即插入冰中。
