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3-4周齡雌性大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養

2024-6-28  閱讀(1074)

  1. 3-4周齡雌性SD大鼠,皮下注射孕馬血清促xing腺激素(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG) 60IU,48h后頸椎脫臼處死。
 
  2. 大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘,轉移到通風柜中的解剖盤中。
 
  3. 在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉,可見白色的脂肪組織,拉出脂肪組織,可見到粉紅色的卵巢,摘除卵巢。
 
  4. 取卵巢放入預冷的含雙抗的緩沖液中,用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。
 
  5. 在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡,釋放顆粒細胞。
 
  6. 將懸液通過70μm篩網過濾至50ml離心管中,之后200g,離心7min。
 
  7. 計數,種植到24孔板和大皿中。
 
  8. FSHR表達鑒定顆粒細胞。


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