日韩欧美一区二区三区免费观看_精品国产欧美一区二区_波多野结衣乱码中文字幕_最新无码国产在线视频2021

您好, 歡迎來到環保在線

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

13564080845

technology

首頁   >>   技術文章   >>   海藻糖酶(TREH)真核蛋白操作步驟

上海帛科生物技術有限公司

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

海藻糖酶(TREH)真核蛋白操作步驟

閱讀:689      發布時間:2023-7-12
分享:

海藻糖酶(TREH)真核蛋白操作步驟:


Ⅰ 實體組織蛋白的提取


1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。


2.  每100mg固體組織置于培養皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;


3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;


4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);


5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。


Ⅱ 培養細胞蛋白提取


1. 貼壁培養的細胞,吸去培養基后,加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次,每次振搖數次以盡量去除培養液;


2. 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;


3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。


4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:


細胞數量


Lysis Buffer加入量


107個


0.5 mL~1 mL


5×106個


0.2 mL~0.5 mL


5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;


6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);


7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融


硅膠膜DNA離心吸附柱(大提)收集管(見關聯產品)

硅膠膜離心吸附柱(小提)收集器(見關聯產品)

硅膠膜離心吸附柱系列(15層膜,小提)

硅膠膜離心吸附柱再生液

生物磁珠2:殼聚糖磁珠

生物磁珠2:巰基磁珠(停產)

生物磁珠2:醛基磁珠(停產)

生物磁珠2:無包被磁珠

生物磁珠:氨基磁珠

生物磁珠:硅基磁珠

生物磁珠:環氧基磁珠

生物磁珠:羧基磁珠

酸洗玻璃珠系列

微量單鏈DNA定量試劑盒核酸電泳套裝

一站式DNA非變性PAGE電泳套裝

一站式DNA尿素-PAGE電泳套裝

一站式miRNA尿素-PAGE電泳套裝

一站式RNA電泳套裝

核酸電泳液

50×TAE電泳液(2500 mL)

RNA電泳液,10×(100 mL)

RNA電泳液,10×(250 mL)

TBE Running Buffer(TBE電泳液,10×)

超快核酸電泳液(干粉)(20 L)

超快核酸電泳液(干粉)(50 L)

核酸電泳液:50×TAE電泳液(250 mL)


會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 昂仁县| 德清县| 剑河县| 昆明市| 四平市| 安庆市| 松溪县| 阿巴嘎旗| 峨边| 谢通门县| 五河县| 介休市| 武川县| 新田县| 额尔古纳市| 苗栗市| 万安县| 沂水县| 马山县| 龙山县| 茶陵县| 汨罗市| 揭阳市| 松原市| 江孜县| 蒲江县| 石狮市| 滦平县| 乡宁县| 阜城县| 峨眉山市| 浦江县| 肥东县| 安龙县| 安义县| 饶河县| 柞水县| 通州区| 日照市| 西藏| 东城区|