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小鼠神經元細胞提取物細胞培養方法

閱讀:1180      發布時間:2021-6-17
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小鼠神經元細胞提取物的細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

A2780/V人卵巢癌長春新堿耐藥株
HCT8/V人結腸癌長春新堿耐藥株
HL-60/Adr人白血病阿霉素耐藥株
K562/Adr人白血病阿霉素耐藥株
A2780/Adr人卵巢癌阿霉素耐藥株
HO-8910/ADR人卵巢癌阿霉素耐藥株
lovo/Adr人結腸癌阿霉素耐藥株
MCF7/Adr人乳腺癌阿霉素耐藥株
BEL/Adr人肝癌阿霉素耐藥株
SGC7901/Adr人胃癌阿霉素耐藥株
BIU-87/Adr人膀胱癌阿霉素耐藥株
A549/Adr人肺癌阿霉素耐藥株
HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株
K562/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株
A2780/Taxol 人卵巢癌紫杉醇耐藥株
HO-8910/Taxol人卵巢癌紫杉醇耐藥株
HCT8/Taxol人結腸癌紫杉醇耐藥株
A549/Taxol 人肺癌紫杉醇耐藥株
hct116/L人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株
lovo/L人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株
HCT8/L人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株
BEL/L人肝癌耐奧沙利鉑細胞株
SMMC7721/L人肝癌奧沙利鉑耐藥株

 

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