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試劑配制：
1、酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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實驗標準品圖：
40 ng/L，5號標準品，150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
20 ng/L，4號標準品，150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
10 ng/L，3號標準品，150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
5 ng/L，2號標準品，150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.5 ng/L，1號標準品，150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

小豆蔻明英文名稱：Adzuki beans Kou Ming分子式：207.28分子量：C16H14O4*：19309-14-9

絞股藍皂苷英文名稱：Gypenosides分子式：768.99分子量：C41H68O13*：hgj

2-正丁呋分子式：124.18英文名稱：2- butyl*：4466-24-4分子量： C8H12O

解毒喹英文名稱：Detoxification分子式：335.83分子量： C18H22ClNO3*：99607-70-2

5,5-二硫-1,1-雙四氮唑分子式：354.41英文名稱：5,5- two -1,1- double sulfur phenyl tetrazole*：1175174分子量： C14H10N8S2

2-氯-6-甲-4-吡甲醛分子式：155.58英文名稱：2- -6- methyl -4-*：479613-16-6分子量： C7H6ClNO

1-芐分子式：175.27英文名稱：1- benzyl piperidine*：2905-56-8分子量： C12H17N

芐分子式：122.17英文名稱：Benzyl hydrazine*：555-96-4分子量： C7H10N2

4-溴噻唑分子式：164.02英文名稱：4- thiazole bromide*：34259-99-9分子量： C3H2BrNS

安格洛苷C英文名稱：Angelo C分子式：784.755分子量：C36H48O19*：115909-22-3

4-羥-3-硝吡分子式：140.1英文名稱：4- hydroxy -3- nitro pyridine*：5435-54-1分子量： C5H4N2O3

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