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試劑配制：
1、酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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實驗標準品圖：
40 ng/L，5號標準品，150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
20 ng/L，4號標準品，150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
10 ng/L，3號標準品，150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
5 ng/L，2號標準品，150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.5 ng/L，1號標準品，150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

3,4-二氯硝分子式：192英文名稱：3,4- two*：99-54-7分子量： C6H3Cl2NO2

3,4二氟芐氨分子式：388.1英文名稱：3,4 two f*：17788-94-2分子量： C18H12Br2

亞二氫鉀(晶體)分子式：120.09英文名稱：Potassium dihydrogen phosphite (crystal)*：13977-65-6分子量： H2KO3P

3-羥分子式：101.15英文名稱：3- piperidine*：6859-99-0分子量： C5H11NO

2-氯-5-溴吡分子式：192.44英文名稱：2- -5- bromide*：53939-30-3分子量： C5H3BrClN

2-溴-6-羧吡分子式：202.01英文名稱：2- -6- group*：21190-87-4分子量： C6H4BrNO2

間三氟甲氯芐分子式：194.58英文名稱：Between three f*：705-29-3分子量： C8H6ClF3

2,4-二甲-5-乙酰噻唑分子式：155.22英文名稱：2,4-二甲- 5 -乙酰噻唑*：38205-60-6分子量： C7H9NOS

5-甲-2-乙酰呋分子式：124.14英文名稱：5- methyl -2- acetyl*：1193-79-9分子量： C7H8O2

1,2-二氯-4-氟-5-硝分子式：209.99英文名稱：1,2- two -4- -5-*：2339-78-8分子量： C6H2Cl2FNO2

(R)-1-芐-3-雙酸分子式：226.74566英文名稱：(R) -1- benzyl -3- 3-aminopiperidine 2HCl*：分子量： C12H19ClN2

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