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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
巴氏阿米巴原蟲PCR檢測試劑盒廠家 | Balamuthia mandrillarisPCR | BK-P8861 |
原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
霉素瓊脂基礎/霉菌鑒別瓊脂基礎/AFPA霉菌分離培養250克國產/進口
香菇 Lentinula edodes葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
爪哇霉無花果曲霉變種 Aspergillus ficuum var.
人回盲腸細胞英文名稱：HCT-8
MKN45(人胃細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠外周血白細胞*培養基SNU-5(人胃細胞)
大鼠胰島素細胞貴州綠僵菌 Metarhizium guizhouense
假單胞菌瓊脂基礎培養基/CN瓊脂 規格： 250g 用途： 用于飲用天然礦泉水檢驗中銅綠假單胞菌的測定。（GB/T 8538-2008）
BCA蛋白定量試劑盒500次國產
牛膽粉/牛膽汁粉/牛膽抽提/Bile powder of cowBR，40%100克國產/進口
菜豆瘤菌 Mesorhizobium phaseoli糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
巴氏阿米巴原蟲PCR檢測試劑盒廠家3-吡唑 83.09 3- amino group*：1820-80-0分子量： C3H5N3
3-(2-吡)甲醛 183.21 3- (2-) Ben Jiaquan*：85553-53-3分子量： C12H9NO
2-甲氧吡 109.13 2- methyl group*：1628-89-3分子量： C6H7NO
三(N-叔丁-3,5-二)鉬 624.81 Three (N- tert butyl -3,5- two*：236740-70-8分子量： C36H54MoN3
5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨 5- -4- -3- - - - 559.72分子量： C19H21BrClN2O9Na*：160369-85-7
2-氯-3-氟吡 131.54 2- chloride -3-*：17282-04-1分子量： C5H3ClFN
4-乙炔聯 178.23 4- acetylene*：29079-00-3分子量： C14H10
2,6-二氯吡 147.99 2,6- two*：2402-78-0分子量： C5H3Cl2N
2-溴-4-噻唑 240.12 2- bromo -4- phenylthiazole*：57516-16-2分子量： C9H6BrNS
2-氟吡-4-甲醛 125.1 2- -4- formaldehyde*：131747-69-8分子量： C6H4FNO
黃芪皂苷II Astragalus saponin II 798.95分子量： C41H66O15*：84676-89-1
技術原理：
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。
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