日韩欧美一区二区三区免费观看_精品国产欧美一区二区_波多野结衣乱码中文字幕_最新无码国产在线视频2021

技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠脂肪酸合成酶（FAS）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠脂多糖（LPS）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

鮭魚傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒廠家9號染色體開放閱讀框115抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C9orf115

X染色體開放閱讀框56抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：CXorf56

鈣調(diào)磷酸酶抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Calcineurin A

CXC趨化因子14抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CXCL14

細胞角蛋白10抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CK10

死亡相關蛋白6/Fas死亡區(qū)相關蛋白抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：DAXX

多能發(fā)育相關基因4抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Dppa4

磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：phospho-DNA PKcs (Thr2647)

D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：DOK2

GTP發(fā)育調(diào)控結合蛋白1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：DRG1

死亡相關蛋白1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：DAP1

磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：ENPP6

長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL5抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：ELOVL5

真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：eIF4G

磷酸化Ephrin B抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：phospho-Ephrin B (Tyr329)