日韩欧美一区二区三区免费观看_精品国产欧美一区二区_波多野结衣乱码中文字幕_最新无码国产在线视频2021

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

小鼠15-脂氧合酶（15-LOX）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠11β羥基類固醇脫氫酶(11β-HSD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豌豆凝集素(PSA)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豚鼠組胺(HIS)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豚鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：GLIPR1

甘氨酰胺核苷酸合成酶抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：GART

GTP酶IMAP家族成員5抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：GIMAP5

α葡萄糖苷酶/溶酶體α-葡糖苷酶抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：GAA

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶κ抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：GSTK1

鳥(niǎo)嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：GNL1

甘氨酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：GNMT

血紅素氧合酶2抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：HO-2

組蛋白H4-K4甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：H3-K4-HMTase SETD7

HIG1區(qū)域家族成員2A抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：HIGD2A

羥基類固醇脫氫酶3α抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：HSD3a

丙型肝炎病毒NS4B抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Hepatitis C Virus NS4B

流感病毒H3N7血凝素抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：H3N7 hemagglutinin

癌細(xì)胞高表達(dá)蛋白Hec1抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：HEC1

同源盒蛋白PRH抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：HMPH