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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>其它系列>> 雙縮脲法蛋白含量測試盒可見分光光度法

雙縮脲法蛋白含量測試盒可見分光光度法
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更新時間:2023-12-24 12:21:58瀏覽次數:943評價

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貨號 BK-01S6965
雙縮脲法蛋白含量測試盒可見分光光度法公司正在出售的產品:抗生素8號進口、國產Antibiotic Agar NO.8250克去甲萬古的效價測定標準平板計數瓊脂進口、國產SPCA250克用于細菌總數的計數平板計數瓊脂進口、國產PCA250克食品細菌總數測定和平板計數MIU基礎進口、國產MIU Medium Base250克細菌的復合生化試驗

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

雙縮脲法蛋白含量測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6965

商品介紹:

測定意義:

強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物;紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質,適用于蛋白質濃度高的樣品,尤其是動物材料。

試劑組成和配置

1、雙縮脲試劑×1瓶,4℃保存;

210mg/ml標準蛋白×1支,-20℃保存;

3、標準蛋白配制:取10mg/ml標準蛋白100μl加雙蒸水100μl,即得5mg/ml標準蛋白溶液。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

2 mg Trequinsin(PDE III抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0   Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0   常溫保存

10mL DNA 溶解液  -20℃保存

2 ug pKK 232-8 pKK 232-8 低溫運輸,-20℃保存

R2A液體 R2A Liquid Medium 250g

1瓶 MDA-MB-435細胞株 MDA-MB-435 低溫運輸和保存

去氧膽酸鹽瓊脂(DC) Desoxycholate Lactose Agar 250g

25mL 乙腈 Acetonitrile 密封陰涼保存

100mL TE Buffer,100X,pH7.6 TE Buffer,100X,pH7.6 常溫保存

5g L-肽(還原型) Glutathione 4℃保存

2 ug pTRE2 hyg pTRE2 hyg 低溫運輸,-20℃保存

雙縮脲法蛋白含量測試盒可見分光光度法C9orf114  9號染色體開放閱讀框114抗體 規格: 0.2ml

RASA3  Ras-GTP激活蛋白3抗體 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗人分泌型IgA 規格: 0.1mlAck1  醋酸激1抗體 0.2ml

NEK6  高度相似的細胞周期蛋白激NEK6抗體 規格: 0.2mlRNF17  環指蛋白17抗體 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgG 規格: 0.1mlproCNP/NPPC  促尿鈉排泄肽前體C抗體 規格: 0.1ml

TFF2  三葉肽因子2抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/RBITC  羅丹明標記的兔抗雞IgG 規格: 0.3ml

Mouse Anti-rabbit IgG/APC  APC標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.1mlABCA1/ABC1  苷三磷酸結合盒轉運體A1抗體 0.1ml

PAK6  P21蛋白激活的蛋白激6抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG  兔抗雞IgG 規格: 1mg

RAMP/CDT2  維甲酸調節核基質相關蛋白 規格: 0.2mlBS69/Adenovirus 5 E1A binding protein  毒5結合蛋白BS69抗體(骨形態發生蛋白受體相關分子1) 規格: 0.2ml

Brucella  布氏桿菌菌體蛋白抗體 規格: 0.2mlMSH3  錯配修復蛋白3抗體 規格: 0.2ml

LAPTM4A  溶體相關膜蛋白4α抗體 規格: 0.2mlTPO  甲狀過氧化物抗體 規格: 0.2ml

STMN2/SCG10  神經生相關蛋白SCG10抗體 規格: 0.1mlTNFSF18  瘤壞死因子配體超家族成員18抗體 規格: 0.1ml

 


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