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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>蛋白含量測定系列>> 葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒紫外分光光度法

葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒紫外分光光度法
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更新時間:2023-12-24 14:58:12瀏覽次數:1305評價

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貨號 BK-01S6975
葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產品:多功能吐溫瓊脂進口、國產APT Agar250克乳酸菌分離培養PYG液體基礎進口、國產PYG Broth Base250克雙岐桿菌增菌培養皰肉基礎進口、國產Cooked Meat Medium Base250克用于厭氧菌的分離培養7.5%氯化鈉肉湯進口、國產7.5% Sodium Chloride Broth250克菌選擇性增菌

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒紫外分光光度法

50管/48樣

紫外分光光度法

BK-01S6975

商品介紹:

測定意義:

葡萄糖-6-磷酸酶((glucose 6 phosphataseG6PaseEC 3.1.3.9)廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中,是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。

測定原理:

G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,變旋酶和葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NAD+還原生成NADH,在340nm下測定NADH生成速率,即可反映G6P活性。

需自備的儀器和用品:

分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

25g 甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷 Methylα-D-Mannopyarnoside 室溫干燥保存

50T 牛結核桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

100 mg Dansyl chloride  Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

500mL Blotto-Antifoam in PBS with azide  Blotto-Antifoam in PBS with azide  常溫保存

30次 超快非醇核酸沉淀劑 Magic Solution DNABACK 4℃保存

2 ug pGL4.20 pGL4.20 低溫運輸,-20℃保存

30次 一站式SDS-PAGE電泳套裝 One-Stop SDS-PAGE Pack 丙烯酰胺溶液4℃保存,上樣緩沖液需要-20℃保存,其余常溫保存

1瓶 HCT-15細胞株 HCT-15 低溫運輸和保存

單料乳糖膽鹽發酵管(含小倒管) Lactose Bile Ferment Broth 10ml*20支/包

1000U 核酸內切 VIII Endonuclease VIII -20℃保存

2mL RNA Loading Buffer,6X RNA Loading Buffer,6X 常溫保存

葡萄糖6磷酸酶(G6P)測試盒紫外分光光度法TBL1Y  轉導β樣蛋白1抗體 規格: 0.2ml

ROR1/ROR alpha  維甲酸相關孤兒受體α抗體 規格: 0.2ml

Claudin 1  緊密連接蛋白1抗體 規格: 0.1ml

ARMCX3  ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體 規格: 0.2ml

BCAT1  胞漿支鏈氨基酸酸轉氨抗體 規格: 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的驢抗羊IgG 規格: 0.1ml

CD26  CD26抗體 規格: 0.2ml

RNF190  環指蛋白190抗體 規格: 0.2ml

beta Bax/BCL2 associated X protein  BCL2相關X蛋白抗體 規格: 0.2ml

phospho-NFKBIA(Tyr305)  磷酸化IKB alpha抗體 規格: 0.1ml

DVL1  蓬亂蛋白1抗體 規格: 0.1ml

phospho-C CBL(Tyr674)  磷酸化原基因CBL2抗體 規格: 0.1ml

 


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