目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>海藻糖系列>> 海藻糖合成酶(TS)測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6719 |
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本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
海藻糖合成酶(TS)測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6719 |
商品介紹：
測定意義: 海藻糖是功能性低聚糖，具有非還原性、保濕性、熱酸穩定性、抗凍結性等特性，是細胞在不良環境條件下產生的一種重要的抗逆應激物之一，它對生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護作用。海藻糖合成酶（Trehalose Synthase）催化麥芽糖合成海藻糖，是海藻糖生物合成的關鍵途徑之一。 測定原理： TS催化麥芽糖產生海藻糖，使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖，通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量，按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。 需自備的儀器和用品： 分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求：
① 易揮發、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現稀釋現使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
48 T 唾液酸測試盒（帶SA標準） Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH9.0 MES Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存
100次 鳥類種屬鑒定PCR Mix(線粒體CO1基因） Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMAl-c2E pMAl-c2E 低溫運輸，-20℃保存
明膠蛋白胨 Gelatin Peptone 250g
250mL Carbonate Buffer（鹽緩沖液）,0.5M,pH10 Carbonate Buffer,0.5M,pH10 常溫保存
腸球菌瓊脂（膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂） Bile Aesculin Azide Agar 250g
25mg 8- 環戊基 -1,3- 二丙基 8-Cyclopentyl-1,3-Dipropylxanthine 室溫保存
50T 蠶白僵菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
20L SDS-PAGE電泳液（干粉） SDS-PAGE Running Buffer 常溫保存
2 ug pXT7 pXT7 低溫運輸，-20℃保存
海藻糖合成酶(TS)測試盒微量法MTCH2 線粒體載體同源蛋白2抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-human IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗人IgM 規格: 0.1ml
phospho-Ep300 (Ser1834) 磷酸化轉錄接蛋白EP300抗體 規格: 0.1mlphospho-B-Raf (Ser446) 磷酸化B-Raf抗體 規格: 0.1ml
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305) 磷酸化雌激素受體α抗體 規格: 0.1mlRobo 軸突導向受體抗體 規格: 0.1ml
TM9SF4 跨膜蛋白9家族成員4抗體 規格: 0.2mlHPV16 L2 人瘤毒16型L2抗體 規格: 0.2ml
C3c/Complement fragment 3c 補體片段C3c抗體 規格: 0.2mlMYRIP/SLAC2-C MYRIP蛋白抗體 規格: 0.2ml
CYP8A1/PTGIS 前列環素合成抗體 規格: 0.1mlPhospho-Jak3 (Tyr980/981) 磷酸化蛋白酪激JAK-3抗體 規格: 0.1ml
beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽1-40(C端)抗體 規格: 0.1mlC19orf46 19號染色體開放閱讀框46抗體 規格: 0.2ml
Mesothelin 間皮素抗體 規格: 0.1mlNEK7 絲/蘇蛋白激Nek7抗體 規格: 0.2ml
GSK3 alpha 葡萄糖合成激3α抗體 規格: 0.1mlG protein beta subunit GI G蛋白/鳥苷酸結合蛋白抗體 規格: 0.2ml
Phospho-CDK9 (Thr29) 磷酸化周期素依賴性激9抗體 規格: 0.1mlPhospho-Bad(Ser134) 磷酸化相關死亡促進因子抗體 規格: 0.1ml
Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗牛IgG 規格: 0.1mlDCAF13 DCAF13蛋白抗體 規格: 0.2ml
PG-C/Pepsinogen 2 胃蛋白原C抗體 規格: 0.1mlCK19 細胞角蛋白19抗體 規格: 0.1ml
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