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單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒?操作步驟

閱讀:1007      發布時間:2021-11-24
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單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒操作步驟:

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變

化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。

④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞

QBC-939, 人膽管癌細胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉移細胞

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系

SK-N-SH, 人神經母細胞瘤細胞

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞

A549, 人肺癌細胞系

SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株

SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞

WM35, 人黑色素瘤細胞

BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株

U-2 OS, 人骨肉瘤細胞

WM451, 人黑色素瘤細胞

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞

C6, 大鼠腦膠質瘤細胞

UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌

Hela, 人宮頸癌細胞系

HNE2, 人鼻咽癌細胞系

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細胞系

786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞

HEC-1A, 人子宮內膜癌細胞系

Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞


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