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Prominence nano 液相色譜儀

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更新時間:2023-07-25 09:28:16瀏覽次數:413次

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支持高精度蛋白質組學分析蛋白組學分析,是蛋白質分析的一項非常重要的技術,一般會使用ESI-LCMS或者MALDI-TOFMS

 支持高精度蛋白質組學分析

蛋白組學分析,是蛋白質分析的一項非常重要的技術,一般會使用ESI-LCMS或者MALDI-TOFMS。許多蛋白質和肽極其微量,需要質譜儀的高靈敏度檢測才能發現,而這就需要一個非常穩定的前端HPLC支持此微量檢測。

Prominence nano系列是一套納升LC系統,可在納升流量下進行精準流速的溶劑輸送。按照應用不同,可以配置成1D和2D系統。

  • 基本性能

納升流速傳感器可保證精確的納升溶劑傳輸

LC-20AD nano采用了新的RFC技術,可對每一個泵進行獨立的流速控制,在納升流速下保證好的流量精度。的RFC系統是由高精度的納升流速感應器控制,確保在任何時間精準的流速測量。同時,流量傳感器配置了精確的溫度控制機制,以減少不確定的環境因素對溶劑輸送的影響。LC-20AD nano在梯度分析能保證很好的流速穩定性,在300nL/min時候保留時間重復性的RSD小于0.2%。

RFC系統的原理

泵內配置了一個流速傳感器,可持續監測泵輸出的納升流速。為了保證流速在設定的范圍內,*采用反饋控制模式,傳感器的監測到真實流速后可以自動調整分流比例,從而保證流速的準確性。另外,分流后的流動相在混合前就經過回流管路回到溶劑瓶,不會浪費溶液。

低溶劑消耗

RFC系統可確保每個泵輸出的溶劑分流后又回到流動相瓶中。就算在高壓梯度分析中,兩種溶劑在分離后并不會像廢棄物一樣排出,從而降低溶劑消耗并減少對環境的影響。

FCV納升閥,低死體積

FCV納升閥體積為25nL,在納升范圍內幾乎不會展寬。在納升LC使用捕集柱進樣和二維系統中,FCV 納升閥是*的。FCV 納升閥通過使用強化的定子和聚醚醚酮的轉子,可以大大降低樣品的吸附,同時獲得很好的耐用性。

FCV nano

高靈敏度分析

SIL-20AC的直接進樣功能與FCV納升閥的低擴射性能相結合可實現微量體積樣品的進樣分析。FCV納升閥后連接的捕集柱可以對進樣的樣品進行捕集濃縮,從而實現高靈敏度分析。而且,SIL-20AC被*為交叉污染低的自動進樣器,這些特征都可以滿足高靈敏度MS分析的要求。

SIL-20AC
  • 納米輔助控制軟件的直觀操作

2維LC的輔助控制軟件

輔助控制軟件可對2維LC進行便捷設置,在軟件圖形界面上可輕松對2維HPLC的進行復雜梯度編程,設定流速等,然后生成方法文件并下載至儀器中進行控制,而圖形化的流路圖和梯度曲線代表當前狀態。簡便的設置可避免單獨使用LC控制軟件帶來的一系列的操作問題。

Prominence nano 2D系統在線的結合了離子交換和反向色譜模式(如下圖所示),每種色譜模式都獨立運行,兩種模式的結合可進行效的分離。Prominence nano 2D系統可與配備Nano ESI源的LCMS系統聯用進行濕法蛋白組學分析,也可以與點靶儀和MALDI-TOF質譜聯用進行干法蛋白組學分析。

易操作的一維體系

1D 納升LC系統對于確認SDS PAGE分離前的蛋白質十分有效,1D系統只需要非常簡單的操作就可以實現。當然,輔助控制軟件在1D和2D系統中使用都是十分方便的。

Nano-Assist一維LC設置圖
  • 蛋白質組分析的應用
高保留時間重復性

蛋白質組分析需要比較不同樣本的色譜峰差異,而樣本中又存在許多特征相似的多肽,對保留時間的重復性要求非常高。Prominence nano系統的高重復性可保證蛋白質組分析的高精數據,配置了RFC系統的LC-20AD nano可以在流速為300 nL/min獲得RSD不超過0.2% 的保留時間重復性。


牛血清白蛋白(BSA)酶解樣品的重復性

2維 LC的高分辨率

在蛋白質組學分析時,單一的1D反相分離不足以提供足夠的色譜峰容量;所以,為了實現復雜樣品的分離,需要進行2D分離以保證足夠的峰容量。Prominence nano系統可以進行2D分析,結合陽離子交換和反相模式,為蛋白質組學分析提供所需的核心技術。下圖為200fmol酵母蛋白質的分析圖,1D分離中的未分離組分在2D中繼續分離成幾個組分,2D分離的峰容量大大大于1D所獲得的效果。

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