實驗手套箱的箱體主要使用的是高透明有機玻璃或亞克力材料制作而成，手套箱主要結構是操作箱體、圓形大門、內過渡倉門、外過渡倉門、手套口、真空氣閥以及真空壓力表。較大的儀器設備物料在實驗時從操作箱體一端的圓形大門進入，關閉操作箱體上的圓形大門、手套口及過渡倉門；小件樣品或儀器設備在實驗時從操作箱體另外一端的外過渡倉門進入過渡倉，關上外過渡倉門和內過渡倉門。
實驗真空手套箱在運作時將真空系統接入真空閥，將真空閥打到常開狀態，對操作箱和過渡倉及手套口同時進行抽真空，當真空壓力表指示數值達到極限真空度?0.1MPa時，關閉真空閥，停止抽真空；然后將惰性氣體系統接入真空閥，打開真空閥對操作箱和過渡倉同時充入高純惰性氣體，直到真空壓力表指示數值達到0，關閉真空閥；重復以上操作2?3次，箱體內氣氛可達到高純惰性氣體氣氛中，厭氧氧水環境，即可對物品進行相應的操作，操作和使用完成后，樣品從過渡倉拿出手套箱，由于整體亞克力高透明性，實現360°*觀察樣品的操作過程。

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