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石蠟包埋組織切片中純化總RNA試劑盒

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更新時間：2017-02-11 15:12:40瀏覽次數(shù)：468次

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廣州健侖生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA

詳細(xì)介紹

石蠟RNA提取試劑盒

RNeasy FFPE Kit

（產(chǎn)品咨詢：/）

簡介：

從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA

1.創(chuàng)新的方法用于克服福爾馬林造成的交聯(lián)

2．有效的釋放RNA而不破壞其完整性

3．高效的實(shí)驗(yàn)方案，在85分鐘內(nèi)即可獲得純化的RNA

RNeasy FFPE Kit專為從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA而設(shè)計(jì)。*的裂解和孵育條件逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。并且裂解緩沖液可將RNA從組織切片中有效釋放出來，防止RNA的進(jìn)一步降解。試劑盒同樣使用DNase和DNase Booster Buffer優(yōu)化，去除基因組DNA的污染。使用RNeasy MinElute離心柱純化獲得的總RNA，洗脫體積可小至10 μl。整個純化流程可在QIAcube*上全自動進(jìn)行。

詳細(xì)信息：（產(chǎn)品咨詢：/）

性能

使用RNeasy FFPE Kit從固定和包埋的樣本中純化獲得的RNA的產(chǎn)量比用其他方法更高。回收得到的完整RNAzui小可達(dá)70 nt，并且?guī)缀鯖]有基因組DNA的污染。用該試劑盒從FFPE樣本中純化得到的RNA 片段非常適用于real-time RT-PCR等敏感的下游應(yīng)用。

原理

用福爾馬林固定組織會導(dǎo)致RNA-RNA和RNA-蛋白質(zhì)的交聯(lián)，這會影響RNA在酶學(xué)分析中的性能。FFPE樣本固定和包埋同樣會導(dǎo)致核酸的嚴(yán)重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了*的裂解和孵育條件來逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。裂解緩沖液能使RNA從FFPE組織樣本中有效釋放，并防止進(jìn)一步的RNA降解。經(jīng)優(yōu)化的條件能純化得到所有可用的RNA，使用RNeasy FFPE Kit從FFPE樣本中得到的RNA的產(chǎn)量比其他方法更高。

操作流程

整個RNeasy FFPE操作流程可在85分鐘內(nèi)完成。使用蛋白酶K裂解樣本僅需15分鐘。裂解后，樣本在80?C下孵育15分鐘。之后，用DNase處理能有效去除樣本中的基因組DNA，包括小的DNA 片段。zui后，使用RNeasy MinElute離心柱即可收集純化的RNA，洗脫體積14–30 ?l。純化過程可在QIAcube*上全自動進(jìn)行。

應(yīng)用

RNeasy FFPE Kit可純化FFPE 樣本中所有大于70 nt RNA，得到適用于RT-PCR等眾多下游應(yīng)用的RNA 片段。但是，從FFPE樣本中純化得到的RNA會嚴(yán)重片段化，不能用于需要完整RNA的下游應(yīng)用。如果使用片段化RNA可能需要做些修飾（例如在RT-PCR時設(shè)計(jì)小的擴(kuò)增子）。進(jìn)行cDNA合成時，不能使用oligo-dT引物，而要使用隨機(jī)或基因特異性引物。

（產(chǎn)品咨詢：/）

技術(shù)參數(shù)：

特點(diǎn)	參數(shù)
Applications	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
Elution volume	14–30 ?l
Format	Spin column
Main sample type	FFPE tissue samples
Processing	Manual (centrifugation), automated (QIAcube)
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein	RNA
Sample amount	15 ?m to 410?m sections
Technology	Silica technology
Time per run or per prep	70 minutes
Yield	Varies