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上海閃晶分子生物科技有限公司
RNasin 是從人胎盤中提取的特異性RNA酶抑制劑,分子量為 51,000 道爾頓的蛋白質,等電點 pH 值為 4.7 。它能特異地與 RNase 以 300 的抑制常數 (ki) 以非共價鍵結合形成復合體而使 RNase 失去活性。
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RNA酶抑制劑概述
RNasin 是從人胎盤中提取的特異性RNA酶抑制劑,分子量為 51,000 道爾頓的蛋白質,等電點 pH 值為 4.7 。它能特異地與 RNase 以 300 的抑制常數 (ki) 以非共價鍵結合形成復合體而使 RNase 失去活性。在緩沖液為 0 -0.5M NaCl , pH5-8 的條件下保持其活性, pH7.8 時活性高。經嚴格質量檢驗,該產品為電泳純,無 RNase 、 Nickase 污染,比活為 100,000 單位 / 毫克蛋白,達到國際標準。
RNA酶抑制劑特性
1. 抑制一般的真核 RNase 包括 RNaseA 、 B 、 C 和人胎盤 RNase ;
2. 不抑制 RNase H , S1 核酸酶, SP6 , T7 和 T3 RNA 聚合酶, AMV 或 M-MLV 反轉錄
酶, Taq DNA 聚合酶, RNase T1 ;
3. 活性 pH 范圍寬廣,但需要 1mM DTT 以保持其活性。
RNA酶抑制劑應用
1. 用在有潛在 RNase 污染的地方。
2. 在 cDNA 合成中保護 mRNA 。
3. 體外轉錄系統、翻譯系統,保護 mRNA 。
4. 用于多核糖體的活性、產量增加。
5. 增進體外病毒復制。
6. 促進同源體系中的 RNA 翻譯。
7. 制備無 RNase 的抗體。
8. 提高 Riboprobe (R) 系統 RNA 合成反應的得率。
濃度 20-40u/ul 。
RNA酶抑制劑單位定義
抑制 5ng RNase A 活性的 50 %所需酶量為一單位。
儲藏緩沖液
20mM HEPES-KOH pH7.6, 50mM KCl, 8mM DTT, 50% 甘油。
RNA酶抑制劑對核酸酶的選擇性抑制
抑制 | 不抑制 |
RNase A | RNase T1 |
RNase B | S1 核酸酶 |
RNase C | 從曲霉屬中提出的 Rnase |
RNA酶抑制劑的性質
活性 | 通過與酶分子非共價結合抑制 RNase 活性 |
抑制類型 | 競爭性抑制 |
結合常數 | Ki=4.4×1014 |
與 RNaseA 結合比例 | 1:1 |
分子量 | 51,000 道爾頓 |
等電點 | pH4.7 |
自由巰基 | 30 |
pH 的適應范圍 | pH5-8( 在 pH7-8 具有高活性 ) |
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