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答:
你可能把抗原抗體弄錯了。測人的試劑盒用的抗體是抗人的,比如測人乙肝病毒,可以用小鼠抗人乙肝病毒。這樣這個抗體才能與人乙肝病毒抗原反應。
夾心法中,包被的抗體與酶標抗體,如果是單抗,理論是不能用一樣的,不過商品化的單抗有可能是混合單抗(識別不同的表位的抗體混在一起)這樣就又可以用一樣的。而多抗用一樣的自然沒問題。
一般的人們總以為試劑盒只分為人,小鼠與大鼠,其實不是的,試劑盒分很多種,有人體,動物的,植物,在這里面還要分ELISA試劑盒,比如說ELISA試劑盒里面還要分:細胞的,免疫的,血清的等等。
像常見傳染病檢測elisa試劑盒有分為:幽門螺桿菌,乙腦,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原體,性病,腺病毒,微小病毒B19,天皰瘡,水痘-帶狀皰疹病毒,生殖支原體,傷寒,沙眼,腮腺炎,人型支原體,麻疹,輪狀病毒,流行性出血熱,淋球菌,萊姆病,柯薩奇,抗解尿支原體,軍團菌,結核,膠原,尖銳濕疣,甲肝,脊髓灰質炎,急性胰腺炎尿*,霍亂,呼吸道合胞病毒,肝吸蟲,副流感,肺炎,帶狀皰疹,傳染性單核細胞增多癥,層粘蛋白,布魯氏桿菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族鏈球菌等等
在使用試劑盒是還要注意:ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
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