一、原理
BCR蛋白分析是一種對樣品中總蛋白進行量化的分析方法，原理是在堿性溶液中蛋白質可以將Cu2+還原成Cu1+（雙縮脲反應），從而出現明顯的紫色，銅離子被還原主要是蛋白質分子中半*、*、*，*四種氨基酸的作用，然而，與Coomassie燃料結合反應不同的是，一般的多肽鍵都能形成顏色，從而減少了由于蛋白質不同的變異性。

與Bradford分析實驗相比較，BCA實驗分析更加客觀，普通的肽鍵就能出現顏色反應，其弊端是其反應容易被蛋白質樣品中的某些化學物質干擾，包括還原劑（二硫蘇糖醇和硫基乙醇等），銅離子螯合劑（EDTA,EGTA）和高濃度緩沖液，但是這些干擾作用可以通過對蛋白質樣品的稀釋進行消除。

二、材料與試劑
1.  牛血清白蛋白（BSA）（Sigma）
2.  BCA蛋白檢測試劑（Pierce）
三、儀器
1.  分光光度計（Tecan）
 
四、操作步驟
1.  制備BSA標準樣。先配制1 ml BSA母液（2 mg/ml，溶于水中），再配制濃度在20-2000 ug/ml 的一系列（5~8）稀釋液。
2.  準備BCA工作液（WR）。計算所需工作液的總體積。WR是將BCA試劑A和BCA試劑B按50：1的比例混合（混合液是綠色澄清溶液）。
3.  若在測量管中測定,每個樣品需要2.0 ml WR。樣品與WR的比例為1：20。
4.  各吸取0.1 ml 標準樣和未知蛋白樣品，加入標記號的測量管中。設兩個一樣的空白對照管，一個用于標準曲線，加入0.1 ml H2O來代替BSA。另一個用于蛋白樣品，加入0.1 ml 蛋白提取液。
5.  每管中加入2.0 ml WR，充分混勻。
6.  蓋上蓋子，37℃溫浴30 min。
7.  檢測前室溫放置10分鐘。
8.  測量OD562的吸光值。
9.  若在微孔板中測定，需要WR試劑。樣品與WR的比例為1：8 or 1：20（當樣品有*）。
10.  各吸取25或10 ul 標準樣或蛋白樣品，加入微孔中。分別以水或蛋白緩沖液作為標準曲線和蛋白樣品的空白對照。
11.  沒孔中加入200 μl WR。
12.  蓋上蓋子，37℃溫浴30 min。
13.  檢測前室溫放置10分鐘。
14.  使用酶標儀測量OD562的吸光值。