實驗原理
紅細胞在低滲鹽溶液 中,當水滲透其內部達一定程度時,紅細胞發生膨脹、破裂。觀察紅細胞在不同濃度鹽溶液 中的溶血程度,可以判斷其對低滲鹽溶液的抵抗力,這種抵抗能力與紅細胞表面積與容積的比值有關,比值小者,紅細胞抵抗力較小,脆性增加。反之抵抗力增大。
實驗方法
材料:
1.171.1mmol/LNaCl溶液、蒸餾 水
2.移液管 、試管 、水浴 箱等
方法:
1.取12支試管 ,分別按下表加入NaCl溶液和蒸餾 水,得不同濃度的NaCl溶液。
試管號 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 |
171.1 M NaCl溶液(ml) | 0.30 | 0.35 | 0.40 | 0.45 | 0.50 | 0.55 | 0.60 | 0.65 | 0.70 | 0.75 | 0.80 | 0.85 |
蒸餾水(ml) | 0.95 | 0.90 | 0.85 | 0.80 | 0.75 | 0.70 | 0.65 | 0.60 | 0.55 | 0.50 | 0.45 | 0.40 |
NaClzui終濃度(mmol/L) | 41.0 | 47.9 | 54.7 | 61.6 | 68.4 | 75.2 | 82.1 | 88.9 | 95.8 | 102.6 | 109.4 | 116.3 |
(g/L) | 2.4 | 2.8 | 3.2 | 3.6 | 4.0 | 4.4 | 4.8 | 5.2 | 5.6 | 6.0 | 6.4 | 6.8 |
2.每管中加入1滴全血(或者肝素抗凝血),輕輕搖勻,在室溫靜置2h后觀察結果。
3.孵育脆性實驗,先將肝素抗凝全血37℃孵育24h后,再做1.2步檢測。
實驗結果計算
先從高濃度開始觀察,上層溶液出現透明紅色者為開始溶血管,管底紅細胞*消失者為*溶血管。
參考范圍:
開始溶血75.2mmol/L-82.1mmol/L(4.4-4.8g/L)NaCl溶液
*溶血47.5mmol/L-54.7mmol/L(2.8-3.2g/L)NaCl溶液
孵育后
開始溶血82.1mmol/L-88.9mmol/L(4.8-5.2g/L)NaCl溶液
*溶血54.7mmol/L-61.6mmol/L(3.2-3.6g/L)NaCl溶液
注意事項
1.CACL必須干燥后準確稱量,用前新配。
2.每次試驗應做正常對照,其結果應在正常范圍內,被檢者與正常對照開始溶血管NaCl溶液濃度相差0.4g/L有診斷價值。
3.所有器具要干燥,血標本應直接滴入液體內,混勻時不能用力過大,以避免體外溶血。
4.在白色背景下觀察結果,判斷*溶血試管時,可低速離心1min后觀察。
5.重度貧血患者紅細胞太少,黃疸患者開始溶血管不易觀察,均可取肝素抗凝血以生理鹽水洗滌后,再用生理鹽水配成50%的紅細胞懸液進行檢測。
6.血液標本應避免用枸櫞酸鹽、草酸鹽和EDTA 鹽抗凝血,以防增加離子強度。如用以上抗凝血標本應用洗滌紅細胞進行檢測。