診狀可能的原因解決方法 

(一)保留時間變化 
1.柱溫變化柱恒溫，必要時需配置恒溫箱 
2.等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動相平衡柱 
3.緩沖液容量不夠用》25mmol/L的緩沖液 
4.柱污染每天沖洗柱 
5.柱內條件變化穩定進樣條件,調節流動相 
6.柱快達到壽命采用保護柱 

(二)保留時間縮短 
1.流速增加檢查泵,重新設定流速 
2.樣品超載降低樣品量 
3.鍵合相流失流動相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向 
4.流動相組成變化防止流動相蒸發或沉淀 
5.溫度增加柱恒溫 

(三)保留時間延長 
1.流速下降管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內氣泡 
2.硅膠柱上活性點變化用流動相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱 
3.鍵合相流失同前(二)3 
4.流動相組成變化同前(二)4 
5.溫度降低同前(二)5 

(四)出現肩峰或分叉 
1.樣品體積過大用流動相配樣,總的樣品體積小于*峰的15% 
2.樣品溶劑過強采用較弱的樣品溶劑 
3.柱塌陷或形成短路通道更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件 
4.柱內燒結不銹鋼失效更換燒結不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品 
5.進樣器損壞更換進樣器轉子 

(五)鬼峰 
1.進樣閥殘余峰每次用后用強溶劑清洗閥,改進閥和樣品的清洗 
2.樣品中未知物處理樣品 
3.柱未平衡重新平衡柱,用流動相作樣品溶劑(尤其是離子對色譜) 
4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽譜)每天新配,用抗氧化劑 
5.水污染(反相)通過變化平衡時間檢查水質量，用hplc級的水 
(六)基線噪聲 
1.氣泡(尖銳峰)流動相脫氣,加柱后背壓 
2.污染(隨機噪聲)清洗柱,凈化樣品,用HPLC級試劑 
3.檢測器燈連續噪聲更換氘燈 
4.電干擾(偶然噪聲)采用穩壓電源,檢查干擾的來源(如水浴等) 
5.檢測器中有氣泡流動相脫氣,加柱后背壓 

(七)峰拖尾 
1.柱超載降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相 
2.峰干擾清潔樣品,調整流動相 
3.硅羥基作用加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動相PH值,鈍化樣品 
4.同前(四)4同前(四)4 
5.同前(四)35.同前(四)3 
6.死體積或柱外體積過大連接點降至zui低,對所有連接點作合適調整,盡可能采用細內徑的連接管 
7.柱效下降用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護柱 

(八)峰展寬 
1.進樣體積過大同(四)1 
2.在進樣閥中造成峰擴展進樣前后排出氣泡以降低擴散 
3.數據系統采樣速率太慢設定速率應是每峰大于10點 
4.檢測器時間常數過大設定時間常數為感興趣*峰半寬的10% 
5.流動相粘度過高增加柱溫,采用低粘度流動相 
6.檢測池體積過大用小體積池,卸下熱交換器 
7.保留時間過長等度洗脫時增加溶劑含量也可用梯度洗脫 
8.柱外體積過大將連接管徑和連接管長度降至zui小 
9.樣品過載進小濃度小體積樣品