原代細(xì)胞中各種組織消化方法集合

時(shí)間：2014/10/22閱讀：734

細(xì)胞培養(yǎng)名稱：新生大鼠皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)

組織來源：種屬：大鼠

年齡：新生1天-2天

取材部位：皮質(zhì)

選用的酶：0.125%

消化時(shí)間：37度15min

注意事項(xiàng)：平時(shí)用1.5ml EP管分裝凍存，用時(shí)解凍，37預(yù)溫1min，以保持好的活性，消化時(shí)每隔5min輕輕搖動(dòng)消化組織。

細(xì)胞培養(yǎng)名稱：成年大鼠室下區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)

組織來源：種屬：大鼠

年齡：成年2.5月零

取材部位：室下區(qū)/室周區(qū)

選用的酶：0.125%+0.02%EDTA

消化時(shí)間：37度25min

注意事項(xiàng)：每隔5min輕輕搖動(dòng)消化組織吹打時(shí)采用分步吹打，先用較粗的巴斯德吸管吹打4-5次，靜置后轉(zhuǎn)移上部懸液，原管加培養(yǎng)液后換細(xì)管吹打。

細(xì)胞培養(yǎng)名稱：大鼠前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)

組織來源：種屬：大鼠

年齡：2月齡180-220g

取材部位：副睪脂肪墊

選用的酶：0.25%-0.02％EDTA

消化時(shí)間：時(shí)間很快大概就1分鐘細(xì)胞就開始變圓

消化流程：倒掉舊培養(yǎng)液，PBS洗2遍，加0.5ml消化液均勻潤(rùn)濕，鏡下觀察，細(xì)胞開始變圓馬上加完培中止消化，1000rpm離心5分鐘，去上清加培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1：2或1：3接種。

注意事項(xiàng)：細(xì)胞消化很快，時(shí)刻觀察。、培養(yǎng)基37度預(yù)熱。

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