EGY48 Chemically Competent Cell 產品說明書
產品規格
EGY48： 10×100μl 保存條件：-80℃
PGBKT7（control vector）：10ng/μl 10μl 保存條件： 4℃
Carrier DNA： 5ug/μl 100 μl 保存條件： 4℃
PEG/liAC： 5 ml 保存條件： 4℃
基因型
MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2
產品說明
EGY48感受態細胞是實驗室常用酵母雙雜用菌株，MATα型，可轉化質?；?/span>mating操作。Transformation marker為: his3, trp1, ura3 ，報告基因為：LEU2 。經PGBKT7質粒檢測轉化效率為104cfu/μg DNA。
操作方法
1. 取100 μl冰上融化的EGY48感受態細胞，依次加入預冷的目的質粒1-5ug，Carrier DNA（95-100度5min,快速冰浴，重復一次）10 ul ，PEG/liAC 500ul并吸打幾次混勻，30度水浴30 分鐘（15 min時翻轉6-8次混勻）。
2. 將管放42度水浴15min （7.5 min時翻轉6-8次混勻）。
3. 5000 rpm 離心 40s 棄上清，ddH2O 400ul 重懸，離心 30s 棄上清。
4. ddH2O 50ul重懸，涂板。
5. 28-30度 ，培養48-96小時。
注意事項
1. 感受態細胞在冰上融化。
2. 轉化高濃度的質?？上鄳獪p少終用于涂板的菌量。
3. 同時轉化2-3種質粒時可增加質粒的用量。
