使用 D3 ES細胞。這是一個對于胎牛血清中生長促進、生長抑制和分化因子非常敏感的細胞系。如何評估呢？我們通過以下幾個方面來具體分析

相關生長效率分析：

     當 ES細胞以非常低的密度傳入包含10％胎牛血清的生長培養基中，檢測開始和支持ES細胞克隆的能力。 

    細胞毒分析：

     當以非常低的密度傳入包含 30％胎牛血清的生長培養基中，檢測 ES細胞和 feeder 細胞的生長能力。

    相關形態學和分化分析：

    檢測胎牛血清支持未分化 ES 細胞克隆的能力。通過堿性磷酸酶活性評估分化程度。未分化的 ES 細胞小顏色深紅粉紅，分化的細胞較大，豐滿， 顏色較淺。

    所有的分析在沒有 ESGRO 的情況下進行的，培養基中出現 ESGRO 會掩蓋由胎牛血清所導致的問題。（ESGRO 或 LIF 經常用來保持 ES 細胞處于 未分化狀態。）

    經過培養發現，大約 8 批中有 1 批可以用來培養 ES 細胞。