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H-E瓊脂平板

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更新時間:2016-06-28 12:07:11瀏覽次數:448次

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H-E瓊脂平板
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操作步驟
加樣:分別設空白孔空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。
配液:將30(48T20倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T20倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
溫育:將30(48T20倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T20倍稀釋后備用。
洗滌:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應此時藍色立轉黃色
10測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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