人蛋白ELISA檢測試劑盒的基本原則有三:
()抗原或抗體的物理吸附到固相載體,可以是蛋白質與聚苯乙烯表面吸附的疏水性部分之間的相互作用,并人蛋白ELISA檢測試劑盒保持其免疫活性;
(2)抗原或抗體酶結合物可以通過然而人蛋白ELISA檢測試劑盒酶共價鍵連接,這種酶結合物仍能保持其免疫和大鼠ELISA試劑盒酶的活性;
(3)酶結合物與相應的抗原或抗體試劑盒,以確定是否免疫反應是根據底物顯色反應的增加,和顯色反應深度成正比樣品的相應抗原或抗體的量,因此,可以按顯色底物水平顯示測試結果。
人蛋白ELISA檢測試劑盒間接法
() 抗原包被:用包被液將PEDV抗原作∶5稀釋包被反應板,每孔00μl,同時設陰性細胞培養物對照孔,置4℃過夜。
(2) 洗滌:用洗滌液洗滌2次,每次2min,瀝干。
(3) 加入被檢血清:用保溫液將被檢血清作∶00稀釋,加入反應板相鄰的兩個孔中,每孔00μl。同時作陰、陽性標準血清對照,置37℃孵育h。
(4) 洗滌3次:方法同上。
(5) 加入酶結合物:用保溫液將酶結合物作∶4 000稀釋,加入反應孔中,每孔00μl,置37℃孵育h。
(6) 洗滌3次:方法同上。
(7) 加入底物:每孔00μl,置室溫暗盒內顯色20min。
(8) 加入終止液:每孔50μl,靜置5min。
(9) 測定OD值:用檢測儀,于492nm波長,按儀器使用及制定標準要求調節儀器,測定各反應孔的OD值,記錄結果。