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國產(chǎn)ELISA試劑盒靈敏性決定od值

時間:2018-3-12閱讀:607
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國產(chǎn)ELISA試劑盒競爭法測抗體有多種模式,可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競爭結(jié)合,抗HBc 一般采用此法。另一種模式為將標(biāo)本與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競爭結(jié)合,洗滌后再加入酶標(biāo)抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)。抗HBe的檢測一般采用此法。
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,可以 采用競爭法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量量愈多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,zui后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。做了十多次的ELISA,能夠得到線性比較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,但是同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)品每次的OD值都不一致,樣品就更加慘不忍睹了,除了酶標(biāo)板之外,其余封閉蛋白,抗體,抗體稀釋度,等等條件都已經(jīng)更換過,但是問題還是沒能解決,懷疑是酶標(biāo)板的問題。求教各位高手,有什么方法可以快速驗證酶標(biāo)板的可靠性。
本身靈敏性很高,每次做出來的值不一樣很正常,特別是od值比較大的時候更是差別很大,但是只要不要偏差太大就好,一般偏差要求0%內(nèi)吧,好的數(shù)據(jù)是3%內(nèi)。首先要穩(wěn)定所有的條件,不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常。在同樣條件下同批次的板子,如果測定不一樣,就是包被問題或者保護(hù)劑的問題,但這兩個都是各個試劑盒的機密,看看文獻(xiàn)里別人怎么做的。
其次每次實驗的標(biāo)曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的,這與抗原抗體反應(yīng)體系、作用時間、顯色時間等等一系列的因素有關(guān)。鑒定該ELISA體系是否可靠,zui關(guān)鍵的指標(biāo)是加標(biāo)回收率和稀釋線性,如果你懷疑的話可以做一下。
一般來說,國外的是沒有問題的。同時你還要看一下說明書中國產(chǎn)ELISA試劑盒的靈敏度,如果你的樣品濃度低于該檢測下限,則無法檢測到,這是很正常的現(xiàn)象,并不是非要每個樣品都要測出值才可以。
容量:        25克    shēng huà shì jì        氧化釤
容量:    RT    0克    shēng huà shì jì        氧化鐠
容量:    RT    25克    shēng huà shì jì        氧化釹
容量:        00克    shēng huà shì jì        氧化鎂
容量:        00克    shēng huà shì jì        氧化鋁H
容量:    RT    250克    shēng huà shì jì        氧化鋁G
容量:    RT    0克    shēng huà shì jì        氧化鋁60GF425
容量:        公斤     shēng huà shì jì        氧化鋁60G
容量:    2~8℃     0毫克    shēng huà shì jì        氧化鋁
國產(chǎn)ELISA試劑盒

 

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