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上海滬宇生物科技有限公司作者
標本需經(jīng)固定后方可染色，Carnoy固定液可按無水乙醇：三 氯 甲烷：冰 醋 酸為6：3：1比例配制。固定后石蠟切片即可。盡量不用新鮮組織恒冷箱切片，因胞質中存在的縮醛 磷脂會出現(xiàn)非特異染色。若必須使用恒冷箱切片，需做切片后固定。用已固定的組織石蠟切片可消除縮醛 磷 脂。減少非特異染色，具體操作如下：
1．切片脫蠟入水；
2．用lmol/L H Cl浸洗；
3．切片放人預熱到60℃1mol/LH Ci內(nèi)6分鐘，（固定的標本為10～15分鐘．Susa固定的標本為18分鐘，水解時間因固定液不同而有差異）；
4．入室溫lmol/LH Cl洗；
5．蒸餾水洗；
6．人Schiff液，于室溫暗處（或外包黑紙）30～60分鐘；
7．人亞硫 酸 鈉水溶液漂洗3次，每次1～2分鐘；
亞硫 酸 鈉水溶液配法：
10%NaHS03 5ml
1mol/L HCl 5ml
加蒸餾水至 100ml
8．蒸餾水洗；
9．脫水、透明、封固。
結果：細胞核內(nèi)DNA染成紫紅色
對照實驗：
雖然Feulgen法是DNA 的特異染色方法，但如果延長水解時間并在室溫下進行反應， Schiff試劑也與醛、酮、醇和縮醛磷脂起反應，因此用Feulgen法檢測DNA時必須嚴格控制鹽酸水解的時間和溫度。為減少假陽性和非特異性染色必須做對照實驗。可按上述步驟做平行對照實驗，僅將第3步，即60℃ lmol/LHCl水解改為室溫15分鐘，其余與上述步驟相同，結果DNA應為Feulgen陰性反應。
Feulgen反應圖
大鼠腎小體和腎小管細胞核呈nigert陽性反應，含紫紅色反應產(chǎn)物
大鼠腎小體和腎小管細胞核呈nigert陽性反應，含紫紅色反應產(chǎn)物
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