促甲狀腺素（TSH）測定試劑盒（酶聯免疫法）說明書

【資料簡介】

此為簡要說明書

 

促甲狀腺素（TSH）測定試劑盒（酶聯免疫法）說明書

【產品名稱】

通用名稱：促甲狀腺素（TSH）測定試劑盒（酶聯免疫法）

英文名稱：Detection Kit for thyroid-stimulating hormone（TSH）（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA）

【包裝規格】96人份/盒，48人份/盒

【預期用途】

用于體外定量測定人血清中促甲狀腺素（TSH）的含量。

TSH是診斷甲狀腺功能和研究下丘腦-垂體-甲狀腺軸的重要指標之一，尤其對先天性甲低有重要意義。在甲狀腺功能評估中，可鑒別原發性和繼發性（垂體和下丘腦性）甲狀腺功能低下癥。并可作為對甲低癥療效觀察指標。此外，可觀察垂體TSH的儲備功能，進一步區別下丘腦和垂體的病變^[1]。

【檢驗原理】

采用酶聯免疫分析方法。采用兩株單克隆抗體，一株用于固相包被制備固相抗體，另一株用于HRP的標記制備HRP-抗體。在包被抗體的微孔中加入TSH（標準或待測樣品）及HRP-抗體，平衡后形成“固相抗體-抗原-HRP-抗體”的復合物。經加底物顯色后，隨著TSH濃度的升高，顯色A值（或稱吸光度、OD值）呈逐漸上升的線性關系。

【主要組成成分】

表1  試劑盒主要組成成分

規格 組分	數量		體積		制品狀態	主要成分
	96T	48T	96T	48T
1）TSH校準品（S1~S6）	6瓶		0.5ml	0.5ml	液  體	TSH(0.3、0.6、1.5、3.0、6.0、12.0mIU/L)，0.02M磷酸鹽緩沖液，2%牛血清白蛋白（BSA），0.1% Proclin-300
2）酶標抗體	1瓶		6ml	3ml	液  體	酶標-抗-TSH（單抗），0.02M磷酸鹽緩沖液，20%新生牛血清，0.1%Proclin-300，0.01%食品紅
3）質控品	2個水平各一支		1ml	1ml	液  體	TSH，*正人血清，0.1% Proclin-300
4）顯色劑A	1瓶		7ml	3.5ml	液  體	11mmol/L 過氧化脲素
5）顯色劑B	1瓶		7ml	3.5ml	液  體	2mmol/L 3,3',5,5'-四甲基聯苯胺
6）終止液	1瓶		7ml	3.5ml	液  體	2mol/L硫酸
7）濃縮洗滌液（20×）	1瓶		15ml	15ml	液  體	0.2M 磷酸鹽緩沖液，含0.5%的吐溫-20
8）預包被板	1塊		96孔	48孔	——	抗-TSH單克隆抗體，聚苯乙烯微孔板
9）封板膜	2張		————
10）封口袋	1個		————

注：校準品可溯源至中國食品藥品檢定研究院國家標準品（編號：150530）。

【儲存條件及有效期】

    2~8℃儲存，有效期為12個月。

【適用儀器】

    適用于各種類型的洗板機、半自動酶免分析儀。

【樣本要求】

取血樣后分離血清，2~8℃保存不超過48小時，*保存可凍存于-15℃以下。

【檢驗方法】

1. 將各種試劑移至室溫平衡半小時，取濃縮洗滌液，根據當批檢測數量，用蒸餾水1：20稀釋，混勻后備用。
2. 將預包被板從密封袋中取出，設一個空白對照孔，不加任何液體；每個校準點依次各設兩孔，每孔加入相應校準品100μl；其余每個檢測孔直接加質控品或待測血清100μl。然后各孔加入酶標抗體50μl，充分混勻，貼上封板膜，置37℃溫育2小時。
3. 手工洗板：棄去孔內液體，洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復3次后拍干。洗板機洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。
4. 每孔加顯色劑A液50μl，顯色劑B液50μl，振蕩混勻后，置37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50μl。
5. 用酶標儀讀數，單波長酶標儀需先用空白對照孔調零點，然后測定各孔吸光值。

【參考區間】

正常參考區間：0.5~5.0mIU/L。

通過測定200份正常人血清，經統計學處理（正態分布，取95%置信區間）確定參考區間。

由于人的個體差異及地域、年齡和性別的不同，所確定的參考區間存在一定差異，因此本說明書所提供的參考區間僅作參考，各實驗室應根據各自地區的正常人群建立自己的參考區間。

【檢驗結果的解釋】

1. 雙波長酶標儀可以不設空白對照孔，也無需調零點。單波長酶標儀必須設空白對照孔，先用空白對照孔調零，然后測量。
2. 作圖法：以校準品S₁~S₆的吸光值為縱軸（log對數坐標），相應濃度為橫軸(log對數坐標),在對數坐標紙上繪制校準品曲線,在校準品曲線上查出待測標本的含量。
3. 計算機：由電腦計算出其濃度。

【檢驗方法的局限性】

1.嚴重溶血、乳糜血可能會影響檢測結果。

2.本產品能夠檢測濃度達到120mIU/L的樣本仍無倒勾現象，不會因為倒勾現象出現假陰性。

【產品性能指標】

• 外觀和物理檢查：試劑盒應組分齊全，內外包裝均應完整，標簽清晰，液體試劑無滲漏。各組分裝量不少于表1中要求。
• 準確性：試劑盒內校準品與相應濃度的國家標準品同時進行分析測定，用雙對數（Log-Log）數學模型擬合，要求兩條劑量-反應曲線不顯著偏離平行（t檢驗）；以TSH國家標準品為對照品，試劑盒內校準品的實測效價與標示值效價的比應在0.900~1.100之間。
• 劑量-反應曲線的線性：用Log-Log數學模型擬合，在0.3~50mIU/L范圍內，劑量-反應曲線相關系數（r）的值應不低于0.9900。
• 精密度

4.1分析內精密度：試劑盒質控品測定結果的變異系數（CV）應不大于15.0%。

4.2分析間精密度：在多次獨立分析之間，質控品測定結果的變異系數（CV）應不大于20.0%。

4.3批間精密度：在多個不同批次產品之間，質控品測定結果的變異系數（CV）應不大于20.0%。

• zui低檢出限：應不高于0.10mIU/L。
• 質控品測定值：每次檢測結果均應在允許范圍內。
• 特異性

7.1檢測濃度為200IU/L的促卵泡生成素（FSH）結果不高于0.10mIU/L。

7.2檢測濃度為200IU/L的促黃體生產素（LH）結果不高于0.10mIU/L。

7.3檢測濃度為1000IU/L的人絨毛膜*（hCG）結果不高于0.10mIU/L。

【注意事項】

• 本品僅供體外實驗。
• 雙波長儀器可以不設空白孔，也無須調零。
• 做實驗前必須將試劑盒恢復至室溫，加試劑前應先搖勻，加樣中應避免交叉污染。
• 溫育反應過程中必須貼封板膜。
• 不同批號試劑不能混用。
• 試劑中含有牛源類成分，保證來自于非瘋牛病疫情國家或地區，加之本產品不直接用于人體，產品在運輸、使用過程中對接觸者和環境沒有安全隱患。但是建議客戶仍視為有潛在風險。

【標識的解釋】

                       儲存條件2~8℃