人Ⅲ型前膠原氨基端肽（PⅢNT）elisa試劑盒使用明說(shuō)書(shū)

【資料簡(jiǎn)介】

人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa試劑盒使用明說(shuō)書(shū)

Elisa kit規(guī)格：48孔配置/96孔配置

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液：1.5ml×1瓶

酶標(biāo)試劑：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）

【人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)試劑盒】本試劑僅供研究使用

計(jì)算：

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

試劑盒組成：

封板膜:2片（48）/2片（96）                       

說(shuō)明書(shū):1份                                                   

密封袋:1個(gè)

標(biāo)準(zhǔn)品：   2700ng/L  0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶  2-8℃保存            

酶標(biāo)包被板:  1×48         1×96             2-8℃保存

樣品稀釋液: 3ml×1瓶       6 ml×1瓶         2-8℃保存

顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶         2-8℃保存

顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶         2-8℃保存

終止液:     3ml×1瓶       6ml×1瓶          2-8℃保存

濃縮洗滌液:（20ml×20倍）×1瓶   （20ml×30倍）×1瓶   2-8℃保存

實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)水平。用純化的人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)，再與HRP標(biāo)記的Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)濃度。

目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)的含量。

服務(wù)承諾： 

供貨期：款到發(fā)貨。
工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)的技術(shù)咨詢(xún)和指導(dǎo) 。請(qǐng)
為客戶(hù)提供來(lái)樣檢測(cè)服務(wù)，zui大限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性(免費(fèi)代測(cè))。

保存條件及有效期：

試劑盒保存：2-8℃| 有效期：6個(gè)月

【人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)試劑盒】樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

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