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人(human)骨堿性磷酸酶(BAP)

2015年04月21日 08:52:24人氣:148來源:上海研域儀器設備有限公司

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關 鍵 詞 人(human)骨堿性磷酸酶(BAP)
【資料簡介】

注意事項

1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。

使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結晶后,請于37℃孵育15分鐘
若24小時內進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。

實驗前準備

1.使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。

2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等

3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液

4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液

5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)

操 作 步 驟

1.取出酶標板,設空白孔,依照次序對應分別加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫(yī)用蒸餾水替代)

2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;

4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;

5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。

6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。

7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。

9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。

10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。

11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。

12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)

13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。

14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。

15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內進行測定。

16、根據(jù)制備的標準曲線,計算樣本含量

結 果 判 斷

1. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;

2、檢測值范圍:0 – 1200U/L

上海研域儀器設備有限公司作者

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