人白介素6ELISA試劑盒使用說明書

【資料簡介】

人白介素6ELISA試劑盒試劑盒組成
30 倍濃縮洗滌液20ml× 瓶7 終止液6ml× 瓶
2 酶標(biāo)試劑6ml× 瓶8 標(biāo)準(zhǔn)品（6ng/L） 0.5ml× 瓶
3 酶標(biāo)包被板2 孔×8 條9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液.5ml× 瓶
4 樣品稀釋液6ml× 瓶0 說明書 份
5 顯色劑A 液6ml× 瓶 封板膜2 張
6 顯色劑B 液6ml×/瓶2 密封袋 個(gè)
標(biāo)本要求
．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人白介素6ELISA試劑盒操作步驟
. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
8 ng/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4 ng/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2 ng/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
ng/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.5 ng/L 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水20 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5 分鐘.
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 人白介素6ELISA試劑盒測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應(yīng)在加終止液后5 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。