人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA試劑盒
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人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA試劑盒
標(biāo)記的免疫測(cè)定
如上所述,免疫測(cè)定是一種很敏感的測(cè)定方法,抗原抗體反應(yīng)后直接測(cè)定形成的沉淀或濁度,敏感度可達(dá)5~10μg/ml,但在臨床檢驗(yàn)中,某些待測(cè)物在標(biāo)本中的含量遠(yuǎn)低于這一水平,因此要尋找增加敏感度的方法。標(biāo)記的免疫測(cè)定是將檢測(cè)試劑中的抗原或抗體用可微量測(cè)定的物質(zhì)加以標(biāo)記,通過(guò)測(cè)定標(biāo)記物來(lái)提高敏感度。在放射免疫測(cè)定和酶免疫測(cè)定中,標(biāo)記物分別為放射性核素和酶,zui后用測(cè)定放射性和酶活力來(lái)計(jì)算待檢物的量,敏感度可比直接測(cè)定沉淀物提高數(shù)百至數(shù)千倍。在標(biāo)記免疫測(cè)定中,一般加入過(guò)量的標(biāo)記試劑以保證與待測(cè)物*反應(yīng)。以標(biāo)記抗體(Ab※)檢測(cè)抗原(Ag)為例,反應(yīng)式如下:
Ag+ Ab※ → AgAb※+ Ab※
在反應(yīng)產(chǎn)物中有與Ag結(jié)合的Ab※和游離和Ab※,如不將兩者分離而測(cè)定標(biāo)記物,測(cè)得的結(jié)果將為兩者之和。因此,游離標(biāo)記物與結(jié)合標(biāo)記物的分離是標(biāo)記免疫測(cè)定中的重要步驟。可采用多種手段,固相載體是其中之一。如將抗原或抗體包被在固相載體上,然后再與標(biāo)記的抗原或抗體直接反應(yīng),結(jié)合的標(biāo)記物被固定在載體上,而游離的標(biāo)記物留于溶液中。這樣可以通過(guò)洗滌將游離的Ab※除去,結(jié)合標(biāo)記物的測(cè)定可在固相上進(jìn)行。
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