人中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
人中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒
顯色
◎HRP催化底物的一步呈色反應,同樣需要一定的時間和溫度,
◎ 一定要按照說明書規定的時間溫度(一般為37°C,10-15分鐘)恒定反應后終止
◎或根據臨界值質控血清吸光度值達0.2左右使的時間而恒定反應時間.
人中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒
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人*結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 | Human Retinol binding protein,RBP ELISA Kit |
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