人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒
使用建議
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,*使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒
酶標儀判讀結果
◎顯色反應終止后應立刻比色(30分鐘內)。
常見的顯色系統有OPD和TMB二種,以后者zui為常見,而TMB酸不易終止因此必須盡快比色以免影響結果。OPD終止后顯棕色,測定波長為490nm;
TMB終止后顯黃色,測定波長為450nm,
二種底物的校正波長均用630nm。
使用雙波長的優點可以消除反應板條上的劃痕手印的干擾。同時要注意反應板應用紙吸干后才能置酶標儀中比色,否則吸光度易出現負值或損壞濾光片。
報告方式
◎定性試驗 國內外為便于統一計算,一律按S/C.O方式報告,S為標本A值,C.O即Cut Off值(陽性判定值)
◎夾心法和間接法以S/C.O≥1為陽性;
竟爭法與中和法以S/C.O﹤1為陽性
◎Cut Off的計算公式以試劑盒說明書的為準常見的有:
◎A) C.O=2.1×N(當N不足0.05時按0.05計),
◎此公式由P/N>2.1換算而來,常用于夾心法。
◎B) C.O=0.5×N,從抑止率公式換算而來,
◎常用于竟爭,中和法
◎C) C.O=N+C(C為常數),用于間接法。
◎D) C.O=C×P+N(C為常數),用于間接法。此公式zui客觀,但對生產廠家要求很高,陰陽性對照測定值要基本恒定。
人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒
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