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信帆生物
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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研究微生物接種法

時(shí)間:2020/10/15閱讀:1135
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研究微生物接種法



微生物三點(diǎn)接種法:

三點(diǎn)接種是為了獲得單菌落所使用的方法之一,它是在培養(yǎng)皿上接種,即用接種針

蘸取少量霉菌孢子,在澆有瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿(俗稱(chēng)平板)上,以等邊三角形的三點(diǎn)輕輕點(diǎn)一點(diǎn),培養(yǎng)后即在此三點(diǎn)上長(zhǎng)出菌落。其優(yōu)點(diǎn)是:同種菌落有三個(gè)重復(fù),同時(shí)在菌落彼此相接近的邊緣常留有一條狹窄的空白地帶此處菌絲生長(zhǎng)稀疏,較透明,還分化出典型子實(shí)體,因此可以直接把培養(yǎng)皿放在低倍鏡下觀察,便于根據(jù)形態(tài)特點(diǎn)進(jìn)行菌種的鑒定。具體操作如下

步驟一,倒平板,將已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基放在水浴鍋上加熱熔化,待冷卻至45℃(手握不覺(jué)太燙為宜)后,用無(wú)菌操作法倒平板。

步驟二,標(biāo)明三點(diǎn)位置,待平板凝固后,在培養(yǎng)皿底部注明菌種、日期等,并以等邊三角形的三個(gè)頂點(diǎn)標(biāo)上記號(hào)。

步驟三,右手拿接種針,先在火焰上燒紅滅菌并在平板培養(yǎng)基的邊緣冷卻且蘸濕。

步驟四,蘸取孢子,將滅過(guò)菌而且蘸濕的接種針伸入菌種管,用針尖蘸取少量霉菌孢子。

步驟五,點(diǎn)接,以垂直法或水平法把接種針上的孢子點(diǎn)到預(yù)先標(biāo)記好的部位,注意切勿刺破培養(yǎng)基。

將培養(yǎng)皿倒置,于28℃恒溫條件下培養(yǎng),48h后觀察生長(zhǎng)情況。

接種是微生物技術(shù)中zui基本的操作之一,接種技術(shù)在微生物的分離純化、生理生化等試驗(yàn)中都非常重要。由于接種的目的不同,所采用的接種方式也不同,接種可分成斜面接種、穿刺接種和三點(diǎn)接種等。選擇正確的接種方法,對(duì)于微生物的分離、純化、增殖和鑒別都有重要作用。因接種方法的不同,常常采用不同的接種工具,如接種環(huán)、接種針、移液管和涂布棒等。
在接種過(guò)程中,必須進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作無(wú)菌操作一般是在無(wú)菌室或接種箱內(nèi)進(jìn)行,并靠近煤氣燈(或酒精燈,一般用酒精噴燈)的火焰操作。有條件的也可在超凈工作臺(tái)上操作。

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