佳和試劑-食品中亞硝酸鹽檢測方法介紹
　　
　　亞硝酸鹽是許多國家允許使用的食品添加劑，不但能使食品的色澤鮮艷，還能防腐。但長期大量食用含有亞硝酸鹽的食物，可對人體的健康構成潛在的威脅，可引起食管癌、胃癌、肝癌和大腸癌。此外許多研究：表明亞硝酸鹽可能與人類先天畸形的發生有關，特別是中樞神經系統先天畸形高發的重要原因之一。而中國是出生缺陷高發國家，中國北方廣大地區是屬于世界上神經管畸形發生率zui高的地區，而這些高發地區與該地區食物中較高的亞硝酸鹽含量密切相關。
　　
　　1光度法
　　
　　1.1紫外可見光度法
　　
　　Griess反應分析法是目前國外普遍使用也是zui早發現的檢測亞硝酸鹽的方法。Griess反應分析法是在酸性條件下，將NO2-與Griess試劑中的對氨基苯黃酸反應，生成重氨鹽，然后再與N－1－萘基－乙二胺偶聯生成紅色染料.該染料在543nm處有zui大吸收，可以用光度法進行測定。Griess法的檢測限可達到0.02-2Um,而且具有很高的靈敏度。然而該反應所需試劑本身都是毒性很大的致癌物質，并且顯色反應的穩定性比較差，同時測定Cu2＋、Fe2＋、S2－、I－等都有干擾。該方法的優點是回收率高，重現性好，而且操作簡便，適應于生產單位常規測定，但在復雜介質中測定會受到影響。
　　
　　1.2熒光光度法
　　
　　該法是通過檢測各種能與亞硝酸根反應，形成一種具有熒光發光性質的化合物，來檢測亞硝酸鹽。據Lapat等報道2－氨基－4－氯－6－黃酸*和4－氨基熒光素均能與亞硝酸根反應，生成具有熒光發光性質的化合物。該化合物可在608nm和518nm下有強烈的熒光發光信號。該方法的優點是靈敏度高、取樣量少、線性范圍寬，可以有效地檢測NO2-且不受檢測液本身顏色和渾濁的干擾，也不受樣品稀釋度的影響，但是操作較為復雜，對環境因素敏感，適用范圍窄。
　　
　　2色譜法
　　
　　2.1液相色譜法
　　
　　該法是以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，各成分在柱內被分離后，進入檢測器進行檢測，從而達到對試樣的分析。液相色譜法具有、高速、靈敏度高、操作方便等優點。吳富忠等建立了一種蔬菜、水果及其制品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的液相色譜同時測定的方法。該方法通過樣品中亞硝酸鹽與硝酸鹽用超純水浸提，經活性炭脫色后過濾濾液，經0.45um水相膜過濾后進樣，在SAX色譜柱上，以0.01mol/L磷酸二氫鉀為流動相進行分離，205nm檢測外標法定量。該方法zui低檢出量分別是亞硝酸鹽氮0.1mg/kg，硝酸鹽氮0.07mg/kg.樣品加標回收率，亞硝酸鹽為91-101.9％，硝酸鹽為94.7-106%，RSD＜５％。該方法速度快，干擾少，結果準確，操作較簡單，靈敏度高，可用于蔬菜、水果及其制品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定。
　　
　　2.2離子色譜法
　　
　　該法是液相色譜法的一種，主要是將試樣進行沉淀，再采取相應方法進行提取和凈化，利用離子交換原理，連續對各種離子進行定量和定性的分析。蔡薈梅等建立了一種離子色譜法測定茶葉中硝酸鹽和亞硝酸鹽的分析方法。該方法是將樣品通過超聲提取后用PVPP吸附和固相萃取柱凈化的方法進行前處理，經高容量陰離子交換柱分離，用抑制型電導檢測器進行檢測。該方法樣品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的回收率范圍分別為88.6-107.5％和89.3-101.2％，相對標準偏差RSD為1.67％和1.13％.該方法測定硝酸根和亞硝酸根具有操作簡便、準確性高、測定快捷的優點。
　　
　　3毛細管電泳法
　　
　　與上述方法相比，毛細管電泳法的突出優勢在于可以實現自動化控制的快速、同時檢測并且試劑用量比較少，分析化合物種類廣泛。建立了一種可以同時測定硝酸根亞硝酸根和草酸根的新型毛細電泳法。該方法采用烙融石英毛細管柱作為分離通道，以50um磷酸鹽作為運行緩沖液，毛細管柱溫25℃，運行電壓25kＶ，檢測波長214nm，進樣壓力3.5kPa，外標法定量測定。該方法亞硝酸鹽、硝酸鹽和草酸鹽的檢測限分別為0.8，,0.3,4.5mg/Ｌ，相關系數均大于0.999。該方法適用于測定蔬菜硝酸根、亞硝酸根和草酸根的含量。
　　
　　4電化學傳感法
　　
　　4.1電位型傳感器
　　
　　電位型傳感器是將溶解在電解質溶液中的離子作用于離子電極而產生的電動勢作為檢測對象，從而實現對離子的檢測。目前研究zui多的是離子選擇性電極，它能以電極電位形式指示溶液中特定離子的活度。因其具有結構簡單、靈敏度好、選擇性高、響應速度快、易于攜帶等特點，可以有效地檢測低濃度的亞硝酸鹽。從早期的PVC膜到現在廣泛使用的TDANr膜、TDAN膜均可以作為離子交換膜，與可作為增塑劑的二丁基鄰苯二甲酸鹽，o－硝基苯辛基醚結合使用可以制得性能優良的亞硝酸根離子選擇性電極。
　　
　　4.2電流型傳感器
　　
　　電流型傳感器是保持電極和電解質溶液的界面為一恒定電位，將被測物質直接氧化或者還原檢測流過外電路的電流從而實現對亞硝酸鹽的檢測。早在20世紀初人們便廣泛地研究不同材料的電極對亞硝酸根的響應，如銅電極、鉑電極、金電極、銀電極、玻碳電極、鉛電極等等。但由于在這些裸電極上電子傳遞速度慢，氧化亞硝酸根所需的過電勢較高，大大影響了傳感器的選擇性和靈敏度。
　　
　　5展望
　　
　　食品中亞硝酸鹽的檢測方法種類繁多，各有利弊。電化學傳感法具有更廣闊的發展前景，因為它不僅具有儀器簡單，操作方便，分析速度快等優點，而且具有靈敏度高，便于與計算機聯機自動化等特點。它不受檢測溶液顏色的影響，克服了光度法的一些不足，且穩定性較好，加之新型納米復合材料的修飾使亞硝酸鹽電極的電流響應成千上萬倍的提高，還有酶的修飾顯著地提高了電極的選擇性，增強了其傳感器的綜合性能。但目前這些電化學傳感器應用在測定亞硝酸根的研究還處在探索改進階段，測量食品中的亞硝酸鹽電化學傳感器的研究現在還存在線性范圍窄、離子干擾等問題，尤其是化學修飾電極的研究還處在試驗階段。相信通過科學工作者的努力，深入研究電化學傳感器測定亞硝酸根的機理，將會研究出更多選擇性更好，檢測精密度和準確度更高的電化學傳感器。