2011 09-08

生物圖像處理的基本術(shù)語(yǔ)和常用參數(shù)

一.像素與灰度1．像素是構(gòu)成顯示器圖像的zui基本單元，按行和列（X和Y）方向排列成矩列。任何一矩列均對(duì)應(yīng)一個(gè)點(diǎn)，這些點(diǎn)稱為像素。單位面積屏幕上像素愈多則圖像愈清晰，即分辨率愈高，顯示的圖像也越細(xì)膩和...

2011 09-05

原位雜交結(jié)合免疫組織化學(xué)技術(shù)

原位雜交結(jié)合免疫組織化學(xué)技術(shù)主要用于在同一細(xì)胞內(nèi)同時(shí)或先后檢測(cè)特定基因在核酸和蛋白質(zhì)或多肽水平的表達(dá)，這樣不僅能了解基因表達(dá)，而且還能研究某種基因表達(dá)的翻譯和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。如果免疫組織化學(xué)檢測(cè)的抗原成分是...

2011 08-31

自動(dòng)化的ELISA技術(shù)

在一般的概念里，ELISA技術(shù)的可操作性強(qiáng)，不需復(fù)雜設(shè)備，甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果，便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對(duì)質(zhì)量控制意識(shí)的加強(qiáng)，盡可能做到zui低限度的減少系統(tǒng)誤差，以及減少勞動(dòng)強(qiáng)度...

2011 08-29

125I標(biāo)記物的鑒定方法

1．放射化學(xué)純度是指單位標(biāo)記物中結(jié)合于被標(biāo)記物上的放射性占總放射性的百分率，一般要求大于95%。常用的測(cè)定方法是利用三氯醋酸將待測(cè)樣品中（預(yù)加白蛋白助沉淀）所有蛋白質(zhì)沉淀，離心后測(cè)定沉淀物（標(biāo)記物）的...

2011 08-24

外源凝集素技術(shù)

外源凝集素（lectin）又稱植物凝集素、凝集素或選擇素，是廣泛存在于動(dòng)植物細(xì)胞內(nèi)的一種糖蛋白成分，是機(jī)體中除抗體和酶之外的第三類具有識(shí)別作用的蛋白質(zhì)，它可與某一特定細(xì)菌發(fā)生特異性結(jié)合，從而對(duì)細(xì)菌具有...

2011 08-22

化學(xué)試劑的等級(jí)

根據(jù)化學(xué)試劑的純度，按雜質(zhì)含量的多少可分為四級(jí)：一級(jí)試劑為純?cè)噭ǔＳ肎·R表示；二級(jí)試劑為分析純?cè)噭ǔＳ肁·R表示；三級(jí)試劑為化學(xué)純?cè)噭ǔＳ肅·R表示；四級(jí)試劑為實(shí)驗(yàn)或工業(yè)試劑，通常用L·...

2011 08-17

Western Blot

【實(shí)驗(yàn)原理】一個(gè)基因表達(dá)*結(jié)果是產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)（或酶）。因此檢測(cè)蛋白質(zhì)是測(cè)定基因表達(dá)的主要標(biāo)志，檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法很多，除ELISA法外，也可用與檢測(cè)DNA和RNA相類似的吸印方法。前兩法有“南”和“...

2011 08-15

電子顯微鏡待檢樣品的制備

一、電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的主要區(qū)別顯微鏡的分辨率取決于所用光的波長(zhǎng)，1933年開(kāi)始出現(xiàn)的電子顯微鏡正是由于使用了波長(zhǎng)比可見(jiàn)光短得多的電子束作為光源，使其所能達(dá)到的分辨率較光學(xué)顯微鏡大大提高。而光源的...

2011 08-05

怎么獲得染料法熒光PCR的可靠數(shù)據(jù)

染料法熒光PCR的數(shù)據(jù)與探針?lè)ǖ南啾龋藬U(kuò)增曲線之外，還增加了熔解曲線分析。如何確定數(shù)據(jù)是好是壞？好的話，數(shù)據(jù)可以使用；壞的話，需要查明原因，擬定下一步的體系優(yōu)化方案。這里探討如何確定數(shù)據(jù)是好是壞，...

2011 08-02

初步分析IHC實(shí)驗(yàn)結(jié)果不好的原因

當(dāng)拿到一種商品化抗體，或自己制備的一抗或贈(zèng)送的一抗，一般可根據(jù)如下原則處理：①、尋找信息；②、如無(wú)任何信息，可先不經(jīng)任何前處理用于IHC檢測(cè)；③、如未經(jīng)處理的染色結(jié)果呈陰性或不理想陽(yáng)性結(jié)果，可用酶消化...

2011 07-28

化學(xué)合成Oligo知識(shí)

Oligo在分子生物學(xué)研究、臨床診斷和藥物治療方面很重要，而對(duì)于實(shí)驗(yàn)成功與否，選擇適當(dāng)?shù)姆椒兓疧ligo其實(shí)是十分關(guān)鍵的。一、為什么要純化？Oligo有機(jī)化學(xué)原理是利用結(jié)合于固相載體（CPG）上的核...

2011 07-26

神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)用的各種基質(zhì)

培養(yǎng)細(xì)胞的*培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如MEM）和添加劑（如血清或無(wú)血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長(zhǎng)因子）組成，培養(yǎng)基的配方一直在改進(jìn)，其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等。基礎(chǔ)培養(yǎng)基絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*（...

2011 07-22

限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)優(yōu)勢(shì)效應(yīng)

某些限制性內(nèi)切酶對(duì)同一底物的不同位點(diǎn)切割效率不同，這種現(xiàn)象被稱為內(nèi)切酶的位點(diǎn)優(yōu)勢(shì)效應(yīng)。1975年，Thomas和Davis（1）發(fā)現(xiàn)EcoRI并不是隨機(jī)切割λDNA分子上的5個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，其中對(duì)λDNA...

2011 07-19

IHC實(shí)驗(yàn)熱誘導(dǎo)的抗原修復(fù)的可能機(jī)制

抗原修復(fù)（antigenretrieval；AR）是否可能?理論研究上尚未清楚，但是以高溫、高壓對(duì)常規(guī)固定石蠟切片進(jìn)行抗原修復(fù)處理的實(shí)踐表明，可以提高抗原—抗體陽(yáng)性檢測(cè)率，同時(shí)也可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性，現(xiàn)已...

2011 07-12

RNA提取常見(jiàn)問(wèn)題

1、RNA降解A、新鮮細(xì)胞：如果試劑沒(méi)有問(wèn)題，且外源性污染也可以排除，那么降解幾乎都來(lái)自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養(yǎng)皿中裂解細(xì)胞，一定要使裂解液能覆蓋住細(xì)胞。B、新鮮組織：某些富含內(nèi)源核...

2011 07-04

抗體—微珠勻漿法

一種在抗體—微珠基質(zhì)上快速捕獲抗原的方法是將抗原溶液與微珠混合，旋轉(zhuǎn)或振蕩制成勻漿。這種方法可使抗原和固相化的抗體之間zui大限度地接觸，是一種促使結(jié)合反應(yīng)快速完成的方法。結(jié)合反應(yīng)完成后，將勻漿裝入層...

2011 06-30

質(zhì)粒提取純度不高的因素

A、蛋白質(zhì)污染建議：選擇推薦量的菌體，離心后小心吸取上清，如果上清液中混有懸浮物，可再次離心，以*去除蛋白質(zhì)。B、RNA污染建議：檢查配送的RNAseA是否*加入到BufferA1中，加入RNAseA...

2011 06-27

單克隆抗體細(xì)胞的選擇

（一）脾細(xì)胞1．材料（1）免疫過(guò)的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。（2）1640培養(yǎng)液（3）2.5％FCS－1640營(yíng)養(yǎng)液2．操作方法（1）拉頸或用CO2處死小白鼠。（2）將小鼠放于70％酒精中浸泡消...

2011 06-20

脂肪酸的β-氧化過(guò)程

一、脂肪酸的β-氧化過(guò)程肝和肌肉是進(jìn)行脂肪酸氧化zui活躍的組織，其zui主要的氧化形式是β-氧化。此過(guò)程可分為活化，轉(zhuǎn)移，β-氧化共三個(gè)階段。1.脂肪酸的活化脂肪酸參加代謝前和葡萄糖一樣也先要活化...

2011 06-16

人們抗壓能力的蛋白的發(fā)現(xiàn)

們每天都要面對(duì)各種各樣的壓力，有的人精神狀態(tài)好，能坦然面對(duì)；有的人則惶惶不安，進(jìn)而患上抑郁癥、焦慮癥等精神疾病。之前這種差異背后的病理機(jī)制尚不清楚，不過(guò)近日研究小組發(fā)表在《自然》雜志上的報(bào)告稱，人大腦...