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Western Blot內(nèi)參抗體選擇原則2016/6/20
內(nèi)參抗體種類很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、LaminB等,那么針對自己的實驗,我們該如何選擇呢?下面簡單介紹下選擇內(nèi)參抗體應(yīng)遵循的原則:一.樣本種屬來源:首先要考慮的就是...
抑癌蛋白p53如何與基因組結(jié)合?2016/6/20
zui近,來自比利時魯汶大學(xué)的遺傳學(xué)家表明,腫瘤蛋白TP53知道應(yīng)該結(jié)合到我們DNA上的哪個確切位置,來防止癌癥。一旦與這個特定的DNA序列結(jié)合,這個蛋白質(zhì)就可以激活正確的基因來修復(fù)受損的細(xì)胞。相關(guān)研...
更安全的干細(xì)胞培養(yǎng)新方法2016/6/17
人類多能干細(xì)胞(hPSCs)的自我更新和分化能力,使其成為細(xì)胞移植療法、藥物開發(fā)、細(xì)胞分化和發(fā)育研究的一種很有前途的材料來源。然而,這些應(yīng)用所必需的大量細(xì)胞,需要hPSC培養(yǎng)物的大量擴增,這個過程與遺...
“改造”免疫系統(tǒng)殺死癌細(xì)胞2016/6/17
在2015年末,美國前總統(tǒng)吉米?卡特宣布,他擴散到肝臟和大腦的轉(zhuǎn)移性黑色素瘤已經(jīng)消失。除了手術(shù)和放療之外,卡特還使用一種免疫治療藥物——癌癥治療中一種前景廣闊的新方法。美國圣母大學(xué)化學(xué)家BrianBa...
細(xì)菌的轉(zhuǎn)化與平板篩選2016/6/16
[實驗原理]感受態(tài)是指細(xì)菌處于容易吸收外源DNA的狀態(tài)。轉(zhuǎn)化是指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)人細(xì)菌的過程。其原理是細(xì)菌處于0℃,CaCl2低滲溶液中,菌細(xì)胞膨脹成球形。轉(zhuǎn)化混合物中的DNA形成...
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化(CaCl2法)2016/6/16
實驗原理受體細(xì)胞經(jīng)過一些特殊方法如化學(xué)試劑法的處理后,細(xì)胞膜的通透性發(fā)生了暫時性的改變,成為能允許外源DNA分子進(jìn)入的感受態(tài)細(xì)胞。進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子通過復(fù)制,表達(dá)實現(xiàn)遺傳信息的轉(zhuǎn)移,使受體細(xì)胞出...
RNA提取的操作步驟2016/6/15
RNA的提取準(zhǔn)備試劑:氯仿,異丙醇,75℅乙醇,無RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC處理過的水配制)操作步驟:1.勻漿處理:a.組織將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml...
DNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和方法步驟2016/6/15
一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)和掌握瓊脂糖電泳法鑒定DNA的原理和方法。二、實驗原理瓊脂糖凝膠電泳是用于分離、鑒定和提純DNA片段的標(biāo)準(zhǔn)方法。瓊脂糖是從瓊脂中提取的一種多糖,具親水性,但不帶電荷,是一種很好的電泳支...
免疫熒光技術(shù)常見問題與解答2016/6/14
1、問:近期要做免疫熒光雙標(biāo),不知哪位有免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)的詳細(xì)步驟及其注意事項?參考見解:我正在做冰凍組織切片的免疫熒光雙染。我的經(jīng)驗是:(1)選取一抗時要來源于兩種不同的動物,我用的是來源于rabb...
常用免疫組織化學(xué)染色方法2016/6/14
(一)、ABC法:(注,下面各種方法,均為手工操作,如沒特別說明,均在室溫下進(jìn)行)1.切片經(jīng)二甲苯Ⅰ5分鐘。2.切片經(jīng)二甲苯Ⅱ5分鐘。3.*Ⅰ30秒。4.*Ⅱ30秒。5.95%酒精Ⅰ30秒。6.95%...
細(xì)胞凋亡檢測技術(shù)與方法2016/6/13
細(xì)胞凋亡(Apoptosis),又稱細(xì)胞程序性死亡(PCD:ProgrammedCellDeath),是指細(xì)胞在一定的理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過程。它是一個主動的,高度有序的,...
常用染料和試劑的配制與使用2016/6/13
1.碘-硫酸法植物細(xì)胞細(xì)胞壁的主要成分是纖維素,纖維素被硫酸水解后,遇碘呈藍(lán)色反應(yīng)。因此用碘-硫酸法可鑒定細(xì)胞壁的成分。試劑配制方法:1%碘液將1.5克碘化鉀溶于100毫升的蒸餾水中,待*溶解后,加入...
微生物細(xì)胞的顯微直接計數(shù)法2016/6/12
(一)實驗?zāi)康牧私庋蛴嫈?shù)板的構(gòu)造、計數(shù)原理和計數(shù)方法,用顯微鏡直接測定微生物總細(xì)胞數(shù)。(二)實驗原理測定微生物細(xì)胞數(shù)量的方法很多,通常采用的有顯微直接計數(shù)法和稀釋平板計數(shù)法。直接計數(shù)法適用于各種單細(xì)...
培養(yǎng)基的制備與滅菌2016/6/12
一、實驗?zāi)康呐c要求:(1)熟悉玻璃器皿的洗滌包裝和滅菌前的準(zhǔn)備工作。(2)學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)基和無菌水的制備,了解培養(yǎng)基配方中各成分的作用、制備流程及各環(huán)節(jié)的操作技術(shù)與應(yīng)用。(3)學(xué)習(xí)并掌握培養(yǎng)基的高壓蒸...
ELISA實驗注意事項和技術(shù)疑問2016/6/8
ELISA實驗前的注意事項為了幫助您更好地解決在實驗中可能碰到的各種問題,我們設(shè)計了這些問題指導(dǎo),配以試劑盒內(nèi)的說明書一起供您參考使用。如果您在實驗中遇到任何暫時無法解決的特殊問題,敬請咨詢,我們將熱...

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