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如何提取病毒核酸技術

2020-1-3  閱讀(2119)

提取病毒核酸的試劑盒和方法技術其特征在于,包括裂解液、結合液、第yi漂洗液、第二漂洗液、洗脫液、二氧化硅磁珠、蛋白酶K和核酸助沉劑,其中,所述第yi漂洗液含有所述結合液和檸檬酸鈉。

核酸的提取純化是進行分子生物學各項研究的基礎,特別是在分子診斷領域,PCR、RT-PCR、Northernblot、RT-qPCR、cDNA文庫構建、酶切等技術手段都需要純度高、完整性好的核酸。但由于外源及內源性核酸酶的存在及其酶活性相當穩定等原因,使得提取和純化高質量的核酸相對比較困難。核酸提取試劑配方對核酸的質量和得率有很大的影響,因此研發高效快速、回收范圍廣、得率高的核酸提取試劑是本領域不斷探索的課題。磁珠法作為近年來興起的新型核酸提取方法,主要原理是基于磁性納米材料一在高鹽環境下對核酸進行特異性的吸附,經過磁性分離和漂洗雜質后,在低鹽溶液中被洗脫下來,從而達到對核酸進行提取純化的目的。

試劑盒目前市場上用于核酸提取的裂解液種類較多,常見的有經典的TRIzol、CATB-LiCl、堿裂解液等。TRIzol含有、異硫氰酸胍等物質,能迅速破碎細胞并抑制細胞內源性核酸酶,保持提取核酸的完整性;但是其用時操作繁瑣、費時,提取樣本中核酸的質量不佳。

 

 



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