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免疫原

擬南芥AKIN10序列的c -末端UniProt: Q38997, TAIR: At3g01090合成klh偶聯肽

主機的兔子

單克隆多克隆

親和純化的血清在PBS, ph7,4

格式凍干

數量100µg

再加入50µl/管無菌水

-20°C保存凍干/重組;一旦重組，使公平，以避免重復凍融循環，請記住，在打開之前，旋轉管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側

免疫定位(IL)，免疫印跡(WB)

推薦稀釋倍數1:50 (IL)， 1:500 (WB)

預期|表觀MW 61,1 kDa

擬南芥總蛋白在Hepes緩沖液(50mM Hepes- naoh pH 7.8;2mM EDTA pH 8.0;德勤約1毫米;磷酸酶和蛋白酶抑制劑雞尾酒)。離心后回收上清，Bradford蛋白法測定蛋白濃度。分別提取5、10、20和30 μg總蛋白，通過SDS-PAGE，轉移到PVDF膜上，用α-AKIN10抗體(Agrisera;摧毀919;1:50 0;1% TBS O/N脫脂牛奶，4°C)。二抗兔hrp標記的二抗在1:20 000,1%脫脂牛奶中TBS中rt孵育2h。沖洗方法如下:阻斷后，用1x TTBS沖洗2倍5分鐘;一抗孵育后，用1倍TTBS沖洗膜5x 5min;二次抗體孵育后,膜被5 x 5分鐘1 x ttb(包含Tween-20 500µl / l),其次是3 x 5分鐘1 x TBS洗緩沖區(TBS和ttb): 1 x TBS三8 g(1升)2.42克氯化鈉調整pH值與鹽酸1 x ttb 7.5 - -7.6: 1 x TBS + 500 ul Tween-20每升。反應是按照制造商的建議進行的，并使用BioRad GelDoc記錄。