免疫原

擬南芥AKIN11序列UniProt: P92958,TAIR: At3g29160合成klh偶聯(lián)肽

主機的兔子

單克隆多克隆

親和純化的血清在PBS, ph7,4

格式凍干

量50µg

再加入25µl的無菌水

-20°C保存凍干/重組;一旦重組，使公平，以避免重復凍融循環(huán)，請記住，在打開之前，旋轉(zhuǎn)管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數(shù)1:10 00 (WB)

預期|表觀MW 58,6 kDa

從2萬個瞬時表達ha標記的KIN10或KIN11(或轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒C)的擬南芥葉肉原生質(zhì)體中提取總蛋白，在10% SDS-PAGE上分離，并在半干燥條件下印跡1h至PVDF。用5%低脂牛奶在TBST (0.05% Tween20)中封閉印跡，室溫(RT)攪拌1h。印跡在anti-HA(左)或anti-KIN11(右)中孵育，1:10 00稀釋，4°C，攪拌過夜。倒出抗體溶液，簡單漂洗2次，然后在TBS-T中攪拌，沖洗1次，每次15分鐘，3次，每次5分鐘。用二抗(抗兔IgG馬蘿卜過氧化物酶偶聯(lián))稀釋到1:10 000，在RT下攪拌1h，進行印跡。按上述方法洗滌污漬，并暴露于薄膜中，根據(jù)制造商的說明使用ECL顯影5分鐘。曝光時間為60秒