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Hela細胞轉染試劑-QuickShuttle-Hela

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更新時間:2023-03-16 12:49:19瀏覽次數:162次

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QuickShuttle-Hela 轉染試劑(Hela 細胞用)

QuickShuttle-Hela 轉染試劑(Hela 細胞用)


貨號:KX0110045 

含量:0.8 ml

 用途:用于 Hela 細胞的瞬時轉染和穩定細胞系構建(立傳立轉)。 

    QuickShuttle系列轉染試劑選擇一覽表
     
    產品名稱 貨號 規格 產品用途
    QuickShuttle-Basic KX0110041 0.8ml 適用于大多數哺乳動物貼壁細胞系,可用于原代細胞和二倍體細胞
    QuickShuttle-Enhanced KX0110042 0.8ml 適用于大多數哺乳動物細胞系,專用于難轉細胞系
    QuickShuttle-Superfast KX0110043 0.8ml 細胞消化和轉染同時進行,立傳立轉??捎糜趹腋〖毎?
    QuickShuttle-293 KX0110044 0.8ml 專用于各種293細胞,立傳立轉
    QuickShuttle-Hela KX0110045 0.8ml 專用于Hela細胞,立傳立轉
    QuickShuttle-BHK-21 KX0110046 0.8ml 專用于BHK-21細胞,立傳立轉


注意事項:

 1. 質粒 DNA:請用能夠去除內毒素的方法制備高質量的質粒 DNA。

 2. 稀釋液:0.85%(W/V)生理鹽水,用低內毒素純水配制,高壓消毒或除菌過濾。

 3. 培養基:經過 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規培養基測試,推薦使用含 5~10%牛血清的 DMEM,若轉染效果不理想可嘗試其它培養基。

 4. 以 24 孔細胞板轉染實驗為例,推薦每孔低內毒素質粒 DNA 用量為 1~2µg、轉染試劑用量為 3~5µl, 請在正式實驗前根據不同培養基用報告基因進行優化。 

5. 立傳立轉要求使用生長旺盛的細胞,即細胞生長至 80-90%成片或剛長滿。若使用生長過老的細胞, 將明顯影響立傳立轉的效率。 

6. 立傳立轉對細胞狀態要求較高,如果轉染效果不理想,可按 QuickShuttle-Enhanced 的轉染方法(見本 說明書第 4 頁),在細胞貼壁后進行標準轉染操作。 

QuickShuttle系列轉染試劑轉染效果圖

轉染效果圖

使用方法 :

1. 將新鮮消化的 Hela 細胞接種到 24 孔細胞板中,每孔 1~2×105細胞,1ml 培養基。備注:可在生 長旺盛的細胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進行轉染,無需 18~24 小時的等候時間。 

2. 將 1~2μg 質粒 DNA 和 3~5μl 轉染試劑分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。備注:質粒 DNA 和轉染試劑的 量需要根據不同培養基來優化,但理論上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范圍。

3. 合并上述兩溶液并混勻。備注:無需其它轉染試劑所需的 10~30 分鐘的等候時間。 

4. 將上述復合物直接加入到細胞培養基中,用加樣器吸打混勻。備注:轉染復合物可直接加入含血清的 細胞培養基中進行轉染。 

5. 將細胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進行培養。備注:無需在轉染后 4~6 小時補加血清或更換培養 基。

 6. 24~72 小時后根據實驗需要進行瞬時表達分析或穩定細胞系加壓篩選。

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