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上海士鋒生物科技有限公司
中級會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養(yǎng)基 維生素檢測培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測培養(yǎng)基 化妝品檢測培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測培養(yǎng)基 支原體檢測培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測培養(yǎng)基 弧菌檢測培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測培養(yǎng)基 檢測培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測,增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

RNA瓊脂糖凝膠試劑配制方法及操作流程

時(shí)間:2014/2/24閱讀:5252
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材料、試劑及器具
1、 材料
總rna提取物。
2、 試劑
(1)0.1%DEPC水:200ml雙蒸去離子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混勻,室溫放置過夜,高壓滅菌。
(2)10x電泳緩沖液。
嗎啉代丙烷磺酸(MOPS) 0.4mol/L(pH 7.0)
NaAc 0.1mol/L
乙二胺四乙酸(EDTA) 10mmol/L
(3)50mL變性瓊脂糖凝膠(1%)
(4)10x電泳緩沖液 5 mL
瓊脂糖 0.5 g
0.1%DEPC水 36.5 mL
加熱溶解,稍冷卻,加入8.5 mL 37%甲醛。
(5)上樣緩沖液:50%,1mmmol/LEDTA,0.4% 溴酚蘭,0.4%二甲苯藍(lán)。
(6)甲酰胺(去離子)。
3、器具
(1)電泳系統(tǒng)
(2)紫外透視儀
RNA瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)原理、試劑配制方法及操作流程
四、操作步驟
1、 將制膠用具用70%乙醇沖洗一遍,晾干備用。
2、 制膠:
稱取0.5g瓊脂糖粉末,加入放有36.5mL的DEPC水的錐形瓶中,加熱使瓊脂糖*溶解。稍冷卻后加入5mL的10x電泳緩沖液、8.5mL的甲醛。然后在膠槽中灌制凝膠,插好梳子,水平放置待凝固后使用。
3、 加樣:
在一個(gè)潔凈的小離心管中混合以下試劑:電泳緩沖液(10x)2μl、甲醛3.5mL、甲酰胺10mL、RNA樣品3.5μl。混勻,置60℃保溫10min,冰上速冷。加入3μl的上樣緩沖液混勻,取適量加樣于凝膠點(diǎn)樣孔內(nèi)。同時(shí)點(diǎn)RNA標(biāo)準(zhǔn)樣品。
4、 電泳:
打開電泳儀,穩(wěn)壓7.5V/cm電泳。
5、 電泳結(jié)束后通過紫外透視儀觀察。
五、注意事項(xiàng)
本實(shí)驗(yàn)中必務(wù)必要去除RNase污染,防止RNA降解。所有試劑和器具需要用DEPC水配制和處理,并滅菌。此外可通過18s rRNA、28s rRNA、5s rRNA的三條帶的亮度判定RNA的完整性。

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