制備不同細胞的臨時制片,觀察、了解細胞的基本形態,學會使用測微尺,通過測量對紅細胞的進化進行分析。
【實驗用品】
一、材料和標本 蟾蜍一只,人血液一滴。
二、器材和儀器 配有目鏡測微尺的顯微鏡一臺、載片十張、蓋片三張、吸水紙、手術器材一套、解剖盤一個、鏡臺測微尺一個、小平皿一個、牙簽。
三、試劑 1%甲苯胺蘭、1%甲基蘭、Ringer氏液(兩棲類用)。
【實驗內容】
一、細胞的基本形態觀察
(一)原理
細胞的形態結構與功能相關是很多細胞的共同特點,在分化程度較高的細胞更為明顯,這種合理性是生物漫長進化過程所形成的。例如:具有收縮機能的肌細胞伸展為細長形;具有感受刺激和傳導沖動機能的神經細胞有長短不一的樹枝狀突起;游離的血細胞為圓形、橢圓形或圓餅形。
不論細胞的形狀如何,細胞的結構一般分為三大部分:細胞膜、細胞質和細胞核。但也有例外。例如:哺乳類紅細胞成熟時細胞核消失。
(二)觀察方法與結果
1.制備蟾蜍脊髓壓片觀察脊髓前角運動神經細胞。
取蟾蜍一只,破壞腦和脊髓,在口裂處剪去頭部,除去延腦,剪開椎管,可見乳白色脊髓,取下脊髓放在平皿內,用Ringer氏液洗去血液后放在載片上,剪碎。將另一載片壓在脊髓碎塊上,用力擠壓。將上面的載片取下即可得到壓片。在壓片上滴一滴甲苯胺蘭染液,染色10分鐘,蓋上蓋片,吸去多余染液。在顯微鏡下觀察,染色較深的小細胞是神經膠質細胞。染成蘭紫色的、大的、有多個突起的細胞是脊髓前角運動神經細胞,胞體呈三角形或星形,有一個圓形細胞核,內有一個核仁(參照照片)。
2.蟾蜍骨骼肌細胞的剝離與觀察
剪開蟾蜍腿部皮膚,剪下一小塊肌肉,放在載片上,用鑷子和解剖針剝離肌肉塊成為肌束,繼續剝離,可得到很細的肌纖維(肌細胞)。盡可能拉直肌纖維。在顯微鏡下觀察,肌細胞為細長形,可見折光不同的橫紋,每個肌細胞有多個核,分布于細胞的周邊(參照照片)。
3.蟾蜍肝臟壓片的制備與觀察
剪開蟾蜍腹腔,取一小塊(約2~3mm 3)肝放在平皿內,用Ringer氏液洗凈,用鑷子輕壓將肝中的血擠出。然后放在載片上,制片方法同脊髓壓片。染色用甲基蘭。顯微鏡下觀察可見肝細胞核染成蘭色,肝細胞緊密排列,擠成多角形(參照照片)。
動物細胞的基本形態觀察和顯微測量 4.蟾蜍血涂片的制備與觀察
取一滴蟾蜍血液,靠近一端滴在載片上.將另一載片的一端呈45°角緊貼在血滴的前緣,均勻用力向前推,使血液在載片上形成均勻的薄層。(圖l一1)。晾干。顯微鏡觀察可見蟾蜍紅細胞為橢球形,有核。白細胞數目少,為圓形。
圖1—1血涂片的制備