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行業產品

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上海源葉生物科技有限公司


公司動態
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    2010/8/19

    DL-賴氨酸鹽酸鹽

    英文名稱：DL-LysineHCLCAS號：70-53-1C6H14N2O2?HCL=182.65含量：≥99.0%性狀：白色或類白色結晶性粉末用途：科研、實驗保存：RT，避光保存【詳細】 閱讀：203

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    2010/8/19

    L-賴氨酸鹽酸鹽

    英文名稱：L-LysineHCL其他名稱：（S）-2,6-二*鹽酸鹽CAS號：657-27-2C6H14N2O2?HCL=182.65含量：≥99.0%比旋光度：+20.4～+21.4o性狀：白色或近白色結晶性粉末.幾乎無臭。263-264℃熔化并分解，通常較穩定，高濕度下易結塊，稍著色。相對濕度60%以下時穩定【詳細】 閱讀：288

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    2010/8/17

    固定化的包被試劑和加入的噬菌體的滴定

    [器材和試劑]●塑料加樣槽（reagentreservoirCostar）●96孔板（“非黏性”的NuncF型微孔板，或者聚丙烯微孔板）●HRP聯結的抗M13抗體（Stratagene）●TMB底物試劑盒（Pierce）●2mol/L硫酸溶液●CBB●微型振蕩器（Bellco）●酶標儀[方法]1．如實驗方案5．1所【詳細】 閱讀：468

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    2010/8/17

    加入的噬菌體和固定化靶標的滴定

    如果噬菌體篩選的過程在微孔板中進行，靶標蛋白固定的基本條件也就建立起來了。通過預先包被親和素（avidin）或者抗標簽的抗體之類的試劑，把靶標蛋白間接地固定到包被過的微孔板上，這樣固定方法對于噬菌粒結合性檢測是有益的。盡管如此，由于噬菌粒結合性檢【詳細】 閱讀：307

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    2010/8/11

    底物噬菌體展示底物文庫的構建

    在一個底物噬菌體展示實驗的準備過程中，*步就是要確定用于文庫展示的載體以及如何構建后繼的底物文庫。單價和多價的pⅢ蛋白噬菌體展示體系都可用于底物噬菌體展示。如果采用的是單價展示體系，只有一部分噬菌體顆粒的表面攜帶有單一的底物序列與親和性結構域【詳細】 閱讀：705

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    2010/8/11

    底物噬菌體篩選器材和試劑

    通常說來，底物的濃度要遠遠小于它們各自酶切反應的Km值和酶的濃度，并且篩選應該在基于koat/KIn值的基礎上進行。然而，在同一次噬菌體展示中，合成肽段的是cat值、Km值及kcat/Km．值有很大范圍的不同。對多價底物噬菌體展示的反應動力學研究表明，底物切割是【詳細】 閱讀：590

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    2010/8/9

    底物噬菌體展示方法的延伸以及未來的方向

    自底物噬菌體顯示技術出現以來，人們對此技術進行了很多完善和修改，并應用于實際之中。在zui后，我們將對一些類似的系統進行綜述，并描述其在解決一系列科研難題中的工用。1底物消減文庫這是一種改良的底物噬菌體技術，用于區別兩種不同蛋白酶的底物特異性。【詳細】 閱讀：640

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    2010/8/9

    從噬菌體展示文庫中進行基于蛋白酶的篩選

    直到zui近，從噬菌體展示文庫中進行的篩選都依賴于被展示蛋白質和靶標配體之間的結合。雖然從小分子到核酸及蛋白質的各種各樣的靶標都已經被使用過了，但這些傳統的生物淘選的方法限制了噬菌體展示技術的應用潛力。在這里，我們描述了僅僅基于蛋白質穩定性/結【詳細】 閱讀：629

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    2010/8/6

    具有疏水性核心的突變體的噬菌粒文庫的鑒定

    使用與其他噬菌體展示方法相同的步驟來對制備出的文庫的文庫容量和多樣性進行鑒定。為了在篩選后得到序列與結構的關系，應保證在噬菌粒文庫中存在合理水平的過量，以確保在篩選步驟中所有克隆都能被取樣，這一點是很重要的。我們通常力爭讓文庫容量比理論上的【詳細】 閱讀：547

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    2010/8/6

    噬菌粒文庫的保險性儲存

    制備好DNA文庫后，用標準方法將DNA電轉人大腸桿菌中，得到轉化株并保存，然后制備噬菌體用于分析和篩選。在液體培養基中將轉化后的細胞進一步培養到對數生長期。經過在液體培養基中的增殖，一些菌液用于甘油保種，剩下的用于制備噬菌體。或者可以通過將整個轉【詳細】 閱讀：773

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    2010/8/4

    單克隆與器官或組織的脈管系統特異性結合的建立

    在篩選和測序后，下一步是將單克隆的結合性用以下三種形式顯示出來：首先，得自靶標器官的、相對于無插入序列的噬菌體及其他器官和組織而數量增加的噬菌體；其次，在器官或組織的脈管系統上進行免疫組化和免疫熒光染色時的陽性染色；第三，我們合成、注射以及【詳細】 閱讀：620

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    2010/8/4

    單個噬菌體插入區域PCR產物的測序

    [器材和試劑]●ABl377型測序儀●ABI的BigDye染液●ABl9700型PCR儀器●ABI藍色葡聚糖/EDTA上樣緩沖液●3mol/L的乙酸鈉●95％及70％的乙醇●0．4pmol/ul的fUSE5“超級反向”引物，或T7“超級上游”引物●一臺帶Qiagen2X96平板轉子或同等轉子的Qiagen4K15C型離心【詳細】 閱讀：576

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    2010/8/2

    擴增來自淘洗的噬菌體群落

    [器材和試劑]●噬菌體緩沖液●XLl-Blue或者DH5。F，TB細胞●IPTG（30mg/m1儲存液，水溶液；儲存在-20℃）●LB-瓊脂培養基+Amp/X-gal/IPTG●Luria-Bertani（LB）[L-液體培養基（1％細菌用胰蛋白胨，0，5％酵母提取物，0．085m01/LNaCl，pH7．2）]●LB+Amp（L-【詳細】 閱讀：764

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    2010/8/2

    利用血清篩選噬菌體文庫的篩選

    [器材和試劑]●PBBST（PBS，0．1％BSA，0．1％Tween-20）●磁分離儀（Dynal）●f1Rl紫外滅活噬菌體●洗脫緩沖液（用*將0．1mol/LHCl調整到pH2．2，1mg/mlBSA）●2rn01/LTris-HClpH9．0●LB-瓊脂培養基（1％細菌用胰蛋白胨，0．5％酵母提取物，1．5％細菌用瓊【詳細】 閱讀：451

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    2010/7/30

    與噬菌體展示的多肽反應的血清抗體的親和純化

    [器材和試劑]●直徑為60mm的聚苯乙烯培養皿（Falcon1007）●包被緩沖液●單克隆抗體（mAb）57D1。該抗體能識別M13噬菌體次要衣殼蛋白（pⅢ）N末端。它是用M13噬菌體顆粒免疫大鼠而獲得的。來自含57D1雜交瘤細胞的上清用50％（NH4）2SO4沉淀，然后在PBS中溶解【詳細】 閱讀：1260

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    2010/7/30

    大量制備血清噬菌粒克隆

    [器材和試劑]●LB+Amp●LB+Amp/Glu[LB，50ug/mlAmp，l％葡萄糖]●IPTG●M13K07輔助噬菌體（Stratagene）●PEG8000（Sigma）●NaCl●TBS●SW40異質同晶聚合物管（Beckman）[方法]1．將含有單克隆噬菌粒的菌落接種到10ulLB+Amp/Glu中，37℃過夜培養（在lac啟動【詳細】 閱讀：613

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    2010/7/28

    從預制的入GTll文庫中制備cDNA插入片段

    [器材和試劑]通用設備及試劑●滅菌水●無菌微量離心試管●無菌移液槍及移液管槍頭●微型離心機●臺式離心機A部分●無菌的0．2ml的細壁聚丙烯微型離心管●pfuDNA聚合酶（Stratagene）●10×pfu緩沖液，由提供PfuDNA聚合酶的廠商提供●dNTP混合液（每個10mmol/L【詳細】 閱讀：632

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    2010/7/28

    用于噬菌體cDNA文庫展示的載體

    互補DNA（cDNA）克隆基因的表達是基因分離與鑒定的一個極為有效的工具。用于篩選的核苷酸探針需要所感興趣基因的原始序列信息，而對于表達cDNA文庫的篩選只需要一個天然的配體或一個特異的抗體（單克隆或多克隆）作為探針。體外篩選入噬菌體或質粒展示的cDNA【詳細】 閱讀：570

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    2010/7/26

    gⅥ-cDNA噬菌粒文庫小規模的獲取和純化

    [器材和試劑]●通用設備及試劑以及以下的設備和試劑：●無菌96孔帶蓋培養板（Costar）●LBAT●R408輔助噬菌體（Stratagene）●振蕩孵育箱●96孔復制板●PEG/NaCl（●PBS[方法]1．將克隆體接種到100ulLBAT96孔培養板上，并在37℃過夜振蕩培養（180r/min）。2．【詳細】 閱讀：727

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    2010/7/26

    用免疫親和反應選擇gⅥ—cDKA噬菌體文庫

    [器材和試劑]●PBST●牛血清蛋白（BSA）（Sigma）●抗血清及gⅥ—cDNA噬菌體文庫●無菌15ml聚丙烯管（Falcon）●立式旋轉機●蛋白A—瓊脂糖凝膠珠（AmershamBiosciences）●無菌0．1mol/L鹽酸*，pH2．2加0．1%（w/v）BSA●無菌2mol/LTris堿（未調節pH）●于板【詳細】 閱讀：575

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